ATP荧光法在食品检上的应用 Slide 1.pptVIP

卫生监督快速检测培训班 ATP荧光法在食品检测上的应用 主讲人: 李智超 食品微生物检测从几天缩短到几小时甚至几分钟 “实时” 食品微生物检测技术 培养法（48-72小时） 菌落总数 大肠菌群 致病菌 大肠杆菌(O157，O157:H7) 沙门 志贺 金葡…… 快速检测技术与方法 细菌总数现场测定法 ATP化学发光法 细胞中三磷酸腺苷脱磷释放能量，与荧光酶发生氧化反应发出化学冷光(ATP?ADP+2P) 国际公认细菌现场测定法 新一代ATP法应用广泛（食品、环境、空气） CAT过氧化酶发光法 加入过氧化氢与细胞中过氧化氢酶作用分解成水和氧气与荧光酶反应发光(H2O2?H2O+O2) 最小检出限103cfu/ml，用于工业加工及冷却水检测 大肠菌群及致病菌快速检测 光电色析法（8-12h） 在培养过程中实时检测，电脑观测培养基色变，根据变色时间定量 测定大肠菌群、大肠杆菌、霉菌和酵母 可车载但仪器较贵 阻抗法（10-14h） 在培养增菌过程中，电脑观测培养基电阻变化，根据电阻变化定量 用常规培养基测定，应用于各种细菌 多用于实验室，仪器昂贵 大肠菌群及致病菌快速检测 PCR仪及DNA探针（24h） 截取细菌特异性DNA片段，聚合酶反应无限扩大定量步骤复杂，专业性高 仪器及引物昂贵 检测时间长 平板纸片显色(24h) 成本低 培养时间长 大肠菌群及致病菌快速检测 胶体金及荧光免疫速测卡（6-10h） 样品横向流动试验，特异性抗体捕捉抗原后色析或发荧光 进行定性或定量分析 食品安全用以检测大肠杆菌O157、沙门氏菌属、葡萄球 菌肠毒素（SEB） 反恐及传染病用以检测炭疽芽孢、霍乱、肉毒杆菌等 定性检测成本低，时间短 普通ATP法包括CAT法根据其原理检测结果为细胞总数 无法分辨非细菌细胞、真菌、霉菌和酵母 应用于表面卫生度、环境及工业污染 无法检测包括食品在内的含有其他活体细胞存在的样品 最小检出限103cfu/ml 半定量检测，无法检测饮用水等细菌含量低的样品 新一代ATP法的特点及应用 新一代ATP法的技术特点 分度裂解分离非细菌细胞的ATP以避免假阳性 非细菌细胞（体细胞）无细胞壁只有细胞膜 分度过滤去除分度裂解后的游离ATP 细菌细胞直径0.5微米 分度过滤可分离或测定霉菌和酵母 霉菌和酵母细胞直径5微米 分度过滤去除干扰物质（如盐，商业消毒剂等）的淬灭作用以避免假阴性 新一代ATP法的特点及应用 新一代ATP法的技术特点 采用了实验室大型荧光仪的PMT技术 光子无限放大技术 提高了仪器分辨率 专用浓缩技术 最小检出限可达1cfu/ml 新一代ATP法的可靠性 精确度 - 美国农业部(USDA)公布结果表明相关性可高达92%~97% 加拿大食品监查协会(CFIA)经过比对试验后发现此原理的相关性达100% 美国密执安大学测试了世界范围的饮用水中细菌和孢子含量 准确度 由于此原理操作简单，减小了系统误差，重复性很好。 灵敏度 此原理灵敏度高达1cfu/ml 新一代ATP法已经认可机构 美国FDA认证 中国CDC评测认证报告 中国质检总局免于型式批准认证 新一代ATP法的应用 水质检测（包括饮用水） 食品检测（各类固体液体食品） 环境及表面卫生度检测 空气检测 反恐 卫生监督快速检测培训班 和润环境分析技术公司 食源中微生物污染快速检测技术 (ATP) 食源中微生物污染快速检测技术 (ATP) 食源中微生物污染快速检测技术 (ATP) 食源中微生物污染快速检测技术 (ATP) 食源中微生物污染快速检测技术 (ATP) 食源中微生物污染快速检测技术 (ATP) 食源中微生物污染快速检测技术 (ATP) Blotter Paper Filtravette? Holding Device Bacterial ATP Free ATP Bacterial Cells Possible Interfering Materials Filtravette? * * 卫生监督快速检测培训班 * *