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Exp.8.甘油三酯测定
Reagent (ml) Serum Standard H2O Isolation reagent H2SO4 * * Determination of triglyceride (TG) 甘油三酯的测定 试管和吸管要保持干燥,不要清洗!! Exp.8 [AIM] 2、 Study the clinical significance 了解甘油三酯测定的临床意义。 1、 Master the principle and the methods of determination of Triglyceride (TG) 掌握测定甘油三酯的原理和方法; [Principle] 1、Isolation:(抽提) skellysolve C-isopropanol mixture 2、Saponification:(皂化) CH2-O CH CH2-O O -C-R O -C-R O R-C-O- + KOH O R-C-OK + CH2-OH CH CH2-OH HO- Key approach 3、Oxidation:(氧化) CH2-OH CH CH2-OH HO- + 2HIO4 2HCHO + HCOOH + 2HIO3 + H2O HCHO + O O 2CH3C-CH2-C-CH3 + NH3 -3H2O N O C-CH3 O CH3-C CH3 CH3 H H 3,5-二乙酰-1,4-二氢二甲基吡啶 4、Color:(缩合呈色) yellow The clinical significance (临床意义) high : 特发性高脂血症idiopathic hyperlipidemia、 动脉粥样硬化artherosclerosis、 糖尿病diabetes、 肾病综合症dropsical nephritis、 肥胖症adiposis、脂肪肝adiposis low: 甲亢hyperthyroidism、 重症肝损伤Grave injury of liver、 吸收不良综合症malabsorption syndrome 10-160mg/dl or 0.11-1.81mmol/L Normal: assay 0.20 --- --- 2.50 0.50 standard --- 0.20 0.20 2.30 0.50 control --- --- 0.20 2.50 0.50 Reagent (ml) supernatant Isopropanol saponifier Oxidant Acetylacetone assay 0.30 1.50 0.50 1.00 1.00 standard 0.30 1.50 0.50 1.00 1.00 control 0.30 1.50 0.50 1.00 1.00 Mix up, incubated at 65℃ for 15min, cool Shake violently for 30 times Place to layer Remove supernatant Mix up, incubate at 65℃ for 15min OD420 [operation] Attentions:(注意) 1、抽提: 0.2ml血清备好,拿干净试管调换 ②剧烈振摇30次,以便充分抽提; 2、皂化、氧化、缩合 用吸管将抽提的上层液转移至第二组三支试管; 依次从空白管、标准管、测定管 吸取0.3ml上层液至第三组三支试管,按上述顺序; 混匀,15min保温后冷却至室温; 最后一步要充分混匀,多振摇几次。 以空白管调零,A420nm比色 (一) *
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