兔神经源性尿路障碍输尿管功能变化和l型钙离子通道表达差异的实验研究.pdf

中英文缩略词对照表 中英文缩略词对照表 引言 兔神经源性尿路障碍输尿管功能变化和L型钙离子通道表达 差异的实验研究 临床医学硕士：苏志强 导 师：文建国 郑州大学第一附属医院泌尿外科、尿动力学中心 河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 中国郑州450052 己I 言 JI 目 神经源性尿路功能障碍(NUTD)是指任何与排尿有关中枢和神经受到损伤出 现的尿路功能障碍…。在治疗NUTD时，除了注重改善下尿路症状外，必须以 保护上尿路为基本原则【2，3】。尽管目前各种常规疗法得到广泛应用，新疗法层出 不穷，但部分患者仍出现反流性上尿路损害，最终进展为慢性。肾功能衰竭而死 亡。其中脊髓发育不良患者30-40％在青少年期出现反流性上尿路损害【4】。脊髓 损伤患者长达50年随访也发现反流性上尿路损害是其死亡主要原因【5】。因此， NUTD严重威胁人类健康，对其上尿路有效持久保护具有重要意义。 NUTD发生反流性上尿路损害的机制尚不完全清楚【6】。研究表明与下尿路继 发性尿动力学高危因素导致的膀胱内高压有关；但在临床工作中常可发现，部 分无下尿路继发性尿动力学高危因素患者却发生上尿路反流性损害；同时，部 分经保守或手术治疗已使膀胱获得低压储尿和排尿功能患者，却在随访中也发 生了反流性上尿路损掣。71。考虑在某些病理因素的作用下，输尿管并发了原发性 自身功能障碍。 输尿管蠕动持续存在、中段至近膀胱段输尿管之间保持足够压力剃度以及膀 胱输尿管开口时产生足够的压力是输尿管主动的抗反流机制，起着主要的抗反 在调节其收缩和兴奋性中起重要的“第二信使”作用【91，是输尿管蠕动持续存在、 维持肌张力、保持稳定的压力梯度的根本。Ca2+动员主要包括细胞外液Ca2+内流 和肌质网存储Ca2+释放。电压依赖性钙通道(VDCCs，主要为L型)介导输尿管平 引言 滑肌细胞(USMC)胞外Ca2+内流并维持正常的肌肉收缩与舒张功能。药物阻断L 型钙通道后自发兴奋性可完全消失【10】。本研究即对输尿管LVDCC进行相关研 究，探讨NUTD的USMC功能障碍的相关分子机制。 鉴于医学伦理及其它原因，很多研究无法在患者身上直接进行。因此，本课 题组严格遵守郑州大学生命科学伦理委员会的相关规定，参照以往学者建立脊 髓横断动物模型的手术方法【ll】，成功建立了NUTD的家兔模型，在此基础上， 对输尿管LVDCC进行分子机制的研究，探讨反流性上尿路损害的输尿管自身原 发性功能障碍的高危因素，并希望为预防反流性上尿路损害发生和阻断其进展 提供理论依据。 2 材料和方法 材料和方法 1． 实验材料 1．1实验动物 健康雄性日本大耳白兔，30只，体重1．2．1．5kg。所有家兔购自并喂养于郑 州大学第一附属医院动物实验中心。 1．2主要试剂及仪器 Trizol Invitrogen公司 cDNA第一链合成试剂盒 北京康为世纪公司 SuperRT UltraSYBR ROX) 北京康为世纪公司 Mixture(With LVDCC及D．actin引物 上海生工公司 DHPR仅1大鼠多克隆抗体 香港Abcom公司 13-actin大鼠多克隆抗体