2010年版药典附录无菌检查和微生物ppt课件.ppt

⒋确认试验　取1%吐温80-玉米琼脂 培养基培养物进行染色，镜检及芽管 试验。 　结果判断 　非革兰阳性菌，显微镜下未见厚膜孢子、假菌丝、芽管判未检出白色念珠菌。 新增微生物限度检查法指导原则 一、抑菌剂效力检查法指导原则 二、药品微生物检验替代方法验证指 导原则 三、微生物限度检查法应用指导原则 四、药品微生物实验室规范指导原则 一、抑菌剂效力检查法指导原则 ⒈指导原则的目的 ⑴是为测定灭菌、非灭菌制剂中抑菌剂的活性，以评价最终产品的抑菌效力及生产企业在制剂研发阶段抑菌剂的确定提供指导。 ⑵为防止药品由于微生物污染而引起变质，对服用者造成不良反应，在药品生产过程中加入一定剂量的抑菌剂。 　　⑶抑菌剂不能用于替代药品生产的GMP管理，不能作为非灭菌制剂降低微生物污染的唯一途径，也不能作为控制多剂量包装制剂灭菌前的生物负载的手段。 ⒉使用范围及原则 ⑴使用范围 如果药物本身不具有充分的抗菌活性，应根据制剂特性添加适宜的抑菌剂，以防止制剂在正常贮藏和使用过程中可能发生的微生物污染和繁殖，对患者造成伤害。 四、试验稀释液、冲洗液增修订为 ⒈ 增加根据供试品的特性，可选用其他经验证过的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液。 ⒉试验中使用的中和剂、灭活剂和表面活性剂除证明其有效性外还应证明对污染的微生物无影响修改为无毒性。  五、方法验证试验增修订内容 ⒈试验菌株 删除铜绿假单胞菌增加大肠埃希菌及大肠埃希菌菌液的制备(同金黄色葡萄球菌)。 ⒉薄膜过滤法 供试品用量 将规定量供试品 按薄膜过滤法过滤 修改为取每种培养基规定接种的供试品总量。 　 六、供试品的无菌检查增修订内容 ⒈检验量　 直接接种法除另有规定外，每份培养基接种的供试品量按表2、表3规定删除采用直接接种法时的规定。 ⒉阴性对照 无菌试验中若使用表面活性剂等应证明其有效性且对微生物生长无影响修改为无毒性。 　　　　 ⒊薄膜过滤法 　①增加了抗生素供试品滤膜选择的指导　应选择低吸附的滤器及滤膜。 ②若需要冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量一般为100ml，且冲洗量不宜过大修改为总冲洗量不得超过1000ml 。 　 ⑴水溶液供试品 含抑菌成分需用适量的冲洗液冲洗膜修改为所用的冲洗量、冲洗方法同方法验证试验. 　 ⑵装有药物的注射器供试品 　 取规定量，删去装上无菌针头….修改为排出注射器中的内容物至无菌容器中，若需要可吸入稀释液或标签所示的溶剂溶解，或非水溶性制剂供试品项下方法操作。 ⑶无菌气雾剂供试品 供试液的制备将供试品置冰室修改为置至少 -20℃的冷冻室约1小时。 　　 　⒋　直接接种法删除β－内酰胺类或磺氨类供试品。 　 　　　　表1 、表2 、表3增修订 表1 （第3列）接种每种培养基改为所需的最少检验数量 表2 （表题）上市抽验样品（液体制剂）的最少检验数量修改为液体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验数量 　第二列每支样品接入每管培养基的最少样品量修改为每支供试品接入每管培养基的最少样品量 　　第三列最少检验数量（瓶或支）≤1 全量 ２0 ① 修改为供试品最少检验数量（瓶或支） １0 ① 注① 每种培养基各接种１０支供试品修改为若供试品每个容器内的装量不够接种两种培养基，那么表中的最少检验数量加倍。 　表3 （表题）将上市抽验样品（固体制剂）的最少检验量 　修改为固体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验数量” 第三列最少检验数量、≤1 全量 ２0 ① 修改为供试品最少检验数量（瓶或支） １0 ① 　注① 每种培养基接种１０支培养基修改为若供试品每个容器内的装量不够接种两种培养基，那么表中的最少检验数量加倍。 三： 微生物限度检查增修定内容 修改内容 1、培养条件 控制菌培养温度35℃～37℃修改为30℃～35℃(细菌、控制菌培养温度相同)。 修改理由 此温度适于所有中温菌生长，一些高温菌在该温度下也可以生长。  增修订内容 2、结果报告 特殊品种可以最小包装单位报告 特殊品种包括∶ 药典规定微量包装药品的检验量可以酌减。 还有一些贵重药品也应考虑检验量。 3、检验量增修订内容 ⑴中药膜剂检验量50 cm2 修改为100cm2 。 ⑵沙门菌检验量