小篮子法测呼吸.ppt.ppt

小篮子法测定呼吸速率 广口瓶法或滴定法 目的和意义 呼吸作用是反应植物生命活动强弱的重要指标之一。常用于植物生理研究及农业生产实践等方面。 有氧呼吸的方程式: C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O 测定CO2 释放量的方法: 滴定法、红外线CO2分析仪法 测定 O2吸收量的方法: 氧电极法 小篮子法测定呼吸速率的原理 在广口瓶中，放入一定量的Ba(OH)2溶液，用其吸收植物材料呼吸过程中释放的CO2。然后用草酸溶液滴定剩余碱量，由空白和样品二者消耗草酸溶液之差，计算出呼吸过程中释放的CO2量。 反应如下： 　Ba(OH)2 + CO2　　BaCO3＋H2O　 （1） 　Ba(OH)2(剩余)+H2C2O4 　 BaC2O4＋2H2O（2） 实验材料：萌发的小麦和大麦种子 主要实验仪器： 1、广口瓶测呼吸装置： 广口瓶一只，加一只三孔橡皮塞，一孔插入装有碱石灰的漏斗，漏斗口塞棉花，将压碎的碱石灰粉末覆盖于棉花上，能吸收进入瓶中的CO2，另一小孔供滴定用，平时用一小橡皮塞塞紧；第三孔插入温度计，记录测定时的温度。瓶盖下面装一小钩，以悬挂小筐，供装植物材料用。 2. 酸式滴定管：装草酸 四、试剂 Ba(OH)2溶液 1/44 mol/L草酸溶液：每ml溶液相当于1mg的CO2 0.05 mol/L-1Ba (OH)2溶液(密封保存) ，溶液配好后先过滤到试剂瓶中，塞紧试剂瓶，尽量减少溶液曝露在空气中的时间，以减少BaCO3 沉淀的产生 酚酞指示剂：1g 酚酞溶于100 ml 95%乙醇中 五、实验步骤 1、空白滴定： 通过滴定孔向广口瓶内放入Ba(OH)2溶液20 ml，加入2滴酚酞试剂。 塞紧小橡皮塞，摇动广口瓶几分钟，使瓶内CO2 充分吸收。 待瓶内CO2吸收后，拔出小橡皮塞，把酸式滴定管插入小孔中，用草酸滴定，至红色刚刚消失为止。 记下草酸溶液用量的毫升数，即为空白滴定值。 2、准备植物材料：取待测小麦或大麦种子8 g(约100粒) ，在天平上称出重量，装在小篮中。 3、正式滴定： 3.1 萌发的种子 倒出废液，用蒸馏水洗凈广口瓶，重加20 ml Ba(OH)2溶液于瓶内，将装有待测种子的小篮迅速挂在小钩上，塞紧瓶塞。 3.2 煮熟的种子 方法同上。 开始记录时间，30分钟后，小心打开瓶塞，迅速取出小篮，立即重新盖紧瓶塞，充分摇动2分钟，使瓶内CO2的完全被吸收，从滴定孔中滴入2滴酚酞。其余操作如前，记下草酸用量，即为样品滴定值。 六、计算呼吸速率 (空白滴定值-样品滴定值)× mg CO2 呼吸速率= 植物组织鲜重 ×时间 呼吸速率的单位一般可采用mg(CO2) · g-1 FW · h-1， mg CO2·ml-1草酸＝1 七、注意事项 操作时勿使口中呼出的气体进入瓶中。 测定期间轻轻地摇动广口瓶，破坏溶液表面的BaCO3薄膜，以利CO2的吸收。 将滴定管轻轻插入橡皮塞中，摇动广口瓶时握住滴定管，以免折断滴定管。 * * * *