创面坏死组织分解物对家兔血清tnf-a il-1 il-6含量的影响-effect of wound necrosis tissue decomposition on serum tnf - a il - 1 il - 6 content in rabbits.docx

广州医科大学硕士学位论文广州医科大学硕士学位论文创面坏死组织分解物对家兔血清TNF-a、IL-1、IL-6 含量的影响 PAGE PAGE 10第一部分探讨创面坏死组织分解物是否对机体炎症因子产生明显影响研究目的研究通过分别建立两种毒性物质经家兔腹腔吸收模型，动态检测血液炎症因 子的浓度变化，对比分析坏死组织分解物与内毒素两种毒性物质对机体炎症因子 影响的异同，探讨分析坏死组织分解物对机体炎症因子的影响特点。实验步骤与方法成年新西兰兔 30 只，体重 2.2±0.3Kg，按随机数字表法将实验兔分成盐水 组、匀浆液组、内毒素组，每组各 10 只，实验开始前实验兔预先饲养 1 周。实 验开始时分别于各组实验兔耳中央动脉抽取 2ml 血液标本，然后分别往生理盐 水组实验兔腹腔注射生理盐水 1ml/kg，匀浆液组腹腔注射无菌匀浆液 1ml/kg， 内毒素组腹腔注射内毒素 40EU/ml/kg，腹腔注射后，分别于 2h、6h、12h、24h、 30h、36h、48h、60h 于实验兔耳中央动脉抽取 2ml 血液标本，常温静置 2h 后，2000r/min 离心 10min，取上清液，标本置于-70 低温冰箱冻存待检。血清标本按 照 ELISA 试剂盒的要求进行处理，采用双抗体夹心法检测血清中肿瘤坏死因子-α、白介素-1、白介素-6 的浓度。数据以 x ±s 表示，采用 SPSS13.0 统计学软 件重复测量数据方差分析对三组炎症因子结果进行统计分析，两两比较用 SNK 法，根据炎症因子含量的变化曲线采取 Cubic 模型曲线拟合，绘制对比图形，进行 spearman 相关分析。实验结果1、坏死组织匀浆液组腹腔注射后很快可见血清 TNF-α、IL-1、IL-6 含量升 高，12h 以后达到高峰期，其峰值分别为 TNF-a( 302.38±69.04) pg/ml、IL-1( 502.28±42.11) pg/ml、IL-6( 231.25±22.08) pg/ml，36h 后开始出现回落。生理盐水组 炎症因子浓度在观察期间无明显变化，两组(匀浆液 vs 盐水)各项指标均呈非常明 显差异[TNF-a（181.20±23.55）pg/ml vs （78.13±8.25）pg/ml，p0.01;IL-1（322.71±56.48）pg/ml vs （213.75±6.57）pg/ml，p0.01、IL-6（204.41±15.93）pg/mlvs （137.64±4.92）pg/ml，p0.01]；2、坏死组织匀浆液组中炎症因子的上升时间早于内毒素组（2-4h vs 5-6h）， 并且部分炎症因子在峰值期间（30h）较内毒素组明显增高[IL-1（502.28±42.11） pg/ml vs（ 387.89±23.20）pg/ml，p0.05；IL-6（231.25±22.08）pg/ml vs （161.13±20.24）pg/ml，p0.05]；3、曲线拟合中匀浆液组中炎症因子浓度变化曲线明显有别于内毒素组。小结创面坏死组织分解物可以诱导机体炎症介质的升高，其诱发机体炎症因子反 应过程有别于单纯内毒素，其可能含有某些不同于、甚至强于单纯内毒素毒性的、 能引起机体炎症反应的有害物质。在第一部分实验中，我们发现创面坏死组织分解物可诱导机体炎症因子不同 程度的升高，并且其诱发炎症因子的反应过程有别于内毒素，提示坏死组织分解 物中可能含有某些不同于、甚至强于单纯内毒素毒性的、能引起机体炎症反应的 有害物质。由于坏死组织分解物中含有的成分较多，具有生物活性的物质以多胺 为主，特别是腐胺与尸胺，因此，为进一步深入探讨坏死组织分解物中何种物质 能够引起如此强烈的炎症因子反应，揭示坏死组织分解物中主要损害物质，本文 设计并进行了更进一步的实验研究。第二部分 探讨创面坏死组织分解产物中诱导血清炎症因子的主要损害物 研究目的研究通过分别建立三种毒性物质经家兔腹腔吸收模型，动态检测血液中炎症 因子的浓度变化，对比分析坏死组织分解产物中对机体炎症因子影响起主导作用 的物质，理清局部坏死与全身损害的关系，为临床开展积极有效的预防和治疗提 供理论依据。实验步骤与方法成年新西兰兔 40 只，体重 2.2±0.3Kg，按随机数字表法将实验兔分成盐水 组、匀浆液组、腐胺组、尸胺组，每组各 10 只，实验开始前实验兔预先饲养 1 周。实验开始时分别于各组实验兔耳中央动脉抽取 2ml 血液标本，然后分别往生 理盐水组实验兔腹腔注射生理盐水 1ml/kg，匀浆液组腹腔注射无菌匀浆液 1ml/kg，腐胺组腹腔注射 1%腐胺 1ml/kg，尸胺组腹腔注射 1%尸胺 1ml/kg，腹 腔注射后，分别于 2h、6h、12h、24h、30h、36h、48h、60h 经实验兔耳中央动 脉抽