常用液相色谱柱规范化使用和保养标准操作规程.doc

******　 　 GMP文件 第第 PAGE 1 页 共 8页 文件题目常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作规程文件编号及版本号SOP-QC-000-00起 草 人起草日期 年 月 日复制份数2份审 核 人审核日期 年 月 日颁发部门质量管理部批 准 人批准日期 年 月 日生效日期年 月 日分发部门质量管理部、质控室编订依据实用中药药品检验检测技术指南目　　的：规范液相色谱柱的使用与管理；液相色谱柱标准化老化与再生；剖析液相色谱柱常见问题与解决办法。延长色谱柱使用寿命，降低色谱柱使用成本。提高分析人员液相色谱柱使用与维护水平。范　　围：适用于使用高效液相色谱仪的仪器分析操作人员及相关管理人员。责　　任：设备员、液相操作人员、质控主管、质量管理部经理、质量受权人。内 容：1.定义1.1 液相色谱柱：指用于液相色谱分离的柱形固定相，由柱管、压帽/卡套、筛板（滤片）、填料、接头等组合而成，可用于液相色谱分析与制备。1.2 色谱柱再生：指色谱柱在非正常情况下，针对异常现象及原因采取的一系列修复补救措施，以提高色谱柱柱效和延长其使用寿命的处理过程。1.3 运载溶剂：指色谱柱生产厂商在柱出厂测试合格后饱和于色谱柱内的合适溶剂，以利于运输保存，多与保存溶剂相同。1.4 保存条件：指色谱柱生产厂商根据不同柱类型及其色谱柱填料的制备、键合、装填、高压定型、净化干燥等工艺条件的不同要求而特别制定的色谱柱保存前净化饱和的处理程序与储存条件，包括净化程序、净化溶剂和保存溶剂、保存条件。1.5 保存溶剂：用于保存色谱柱并指定了溶剂组成与比例的溶液。1.6 反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等。常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。1.7正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱，常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。1.8氨基柱（-NH2）：可以同时用于正相条件和反相条件，但多用于正相色谱条件。使用时需注意，正相反相交替使用时必需用异丙醇过度，保证柱保存溶剂与流动相互溶。[氨基柱出厂保存溶剂多用正相溶剂，例如：正己烷-乙腈（99：1）]。2.液相色谱柱的使用及保养文件题目常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作规程文件编号及版本号SOP-QC-000-002.1普通C8及C8反相色谱柱的老化处理与使用保养程序新购色谱柱出厂前均采用适合的运载溶剂饱和，密封，由于运输过程周期较长，柱床容易干涸，所以新柱使用前需重新饱和与老化。若老化方法不正确或时间不够，极易导致色谱柱在使用较短时间后即产生分离度下降、峰形变差、峰拖尾等柱效降低的情况。需根据色谱柱不同类型选择不同饱和与老化方法。2.1.1老化老化前准备：准备新鲜的超纯水及色谱级乙腈或甲醇，冲洗色谱仪器系统，保证仪器系统管路干净。将色谱柱反向连接，不接检测器。用水-有机相（90：10～95:5），以0.3ml/min～0.6ml/min流速冲洗20min～30min（目的是冲洗出柱入口端无机杂物与筛板孔杂物，使筛板正常）。再将色谱柱正向连接，不接检测器。用水-有机相（90：10～95:5），以0.3ml/min～0.6ml/min流速冲洗20min～30min（目的是冲洗出柱出口端无机杂物与筛板孔杂物，使筛板正常）。连接检测器，开启柱温达30℃～40℃，用水-有机相（90：10～95:5），以0.3ml/min～0.6ml/min流速冲洗4h以上（目的是充饱和色谱柱，去除柱内空气）。老化色谱柱：用水-有机相（10：90～5:95），以0.3ml/min～0.6ml/min流速冲洗2h以上[或在120min内以水-有机相（95:5→0:100）梯度变化，以0.3ml/