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GTC实验室操作程序 精液采集 人工受精与自然交配的根本不同在于，自然交配中许多公猪的工作，在人工受精中都由人工受精员来完成了。在人工受精中，技术员必须提供良好的精液处理、包装条件，以保证精子能够维持较高的受精能力，所以要求人工受精技术员要能够很好的理解精子生产的自然过程，以便能够在人工受精实验室尽可能的模仿这个过程。 采精时需要的设备： 采精容器，应该使用那些能够保温并且容易和清洗的容器。 牛奶过滤纸或手术消毒纱布。 一次性乳胶手套或尼龙手套。注意，有些种类的手套对手套对精子有毒害作用。 消毒、干燥以及储存设备。 采精 即使使用手套，也要在采精前洗净并擦干采精的手。 排空积尿，用干净的毛巾擦净公猪的下身。 引导公猪爬上假台畜。去掉外层污染的手套。 用戴手套的手抓住其阴茎，模仿母猪的子宫颈形成一个有力的螺旋，锁定顶端并顺势拉出 一旦成功，将稳定下来，开始射精。可分为几个不同的部分： 首先的胶体部分：不要收集，其中的精子很少。 清亮部分：含有的精子很少，不必收集。 富精部分：呈乳状，含有大部分精子，需要完全收集。 最后的胶体部分：不要收集。 要注意避免包皮液、尿液混入到射出精液中，在采精过程中包皮液会沿着阴茎流下来混入精液中，杀死精子，可以用纸巾缠绕在阴茎上，避免这个问题。 公猪的射精时间可能持续5-15分钟。因此要有耐心，在公猪完全射精完全之前不要松手。 采精后马上冲洗采精区，否则干了的精液和胶体很难清洗。 精液的处理 精液处理的目的，就是以一种高效、低成本的方法来最大数量地获取高质量精液头份数。 人工受精实验室所需的基本设备 显微镜：应包括100倍，400倍1000倍物镜（油镜），双筒目镜，恒温载物台。 盖玻片和和毛细吸管。 电子称。 温度计：2根30cm的温度计。 若干广口容器：体积从1升到5升的玻璃或塑料广口容器。 精液包装设备。 7）光密度仪。 8）水浴锅：用来控制稀释液的温度。 9）精液分装袋或输精瓶及瓶盖。 10）精液储存设备。 11）消毒设备。 12）输精管。 13）双蒸水制造系统。 14）烘干设备：用来干燥和储存所有采集和检测精液用的设备。 精液质量的评估 精液的质量的评估应在采精后立即进行，有些评估项目在精液稀释前进行，有的要在稀释后进行。 原精检测项目：气味、体积、数量、最初活力、最初形态。 稀释后的检测项目：稀释后活力、储存后活力、混合精液的活力。 测原精活力：用显微镜将原精样本放大到100倍和400倍来评估原精活力。观察的时候要选取载波片上的几个不同点，以使样本具有代表性，如果原精活力不高，在0-1分之间，那就再制作一个样本，但必须保证载波片以及吸管的温度为35度。 稀释后精液的活力：取一滴稀释后的精液，放在显微镜下，可观察到样本中的单个精子，稀释精液的活力可以用样本中向前直线运动精子的百分比表示。如果活力低于60%就抛弃。 稀释精液 精液稀释有两个原因：增大体积以提高其利用率；为精子提供一个有利于保存的环境。 准备稀释液 用电子称准确称取需要量的稀释剂，要按照生产商说明的使用量来做。注意不正确的稀释液浓度将会杀死精子。在称取所需要量的稀释粉后，把其加入到一定量的蒸馏水中，预热蒸馏水到30-35度，这可使稀释粉溶解的更快。准备每日用量的新鲜稀释液，不要在其配置好24小时以后再使用；稀释液最好在配制好60分钟以后使用。 稀释精液 使稀释液和精液温度相同是很重要的。在稀释精液前，测量精液和稀释液温度（精液温度大约35度），如果两者温度相差不超过1度，就可将适量的稀释液加入到精液中，并将两者轻柔混匀。每包装头份应至少含有20亿个有效精子，至多含有45个有效精子，输精体积至少为70ml。因精液被稀释好，就可以分装了。分装好后，贴好写有采精日期、公猪耳号的标签。然后发送或将其储存在15-20度的精液储存箱中。 精液的储存和运输 精液的储存 最好的精液储存方法，是将其储存在温度设置在15-20度懂得温控箱中，有些稀释后的精液在储存期间会沉淀、聚集，所以应该每日摇匀两次。稀释的精液在储存2-3日后，有效精子数将会减少，因此，在使用前需要检查精液的活力，可保证使用的浆液活力大于60%。在略低的温度下（15-20度）可延长精子的存活期。这是因为降低温度可使精子的代谢水平降低，较低的代谢水平将会消耗较少的营养物质，产生较少的废物，从而延长精子的寿命：但低于15度的温度将会损害精子。猪的精子比其他动物的精子对于温度更为敏感，而高于20度的温度将不会降低精子的代谢水平，因此，密切注意并控制精液储存期间的温度变化对于维持精液的活力是很重要的。 精液的运输 当精液需要从其他采集包装的地方运送到受精的农场时，一定要确保在整个运输过程中，其质量得到保证。在任何情况下，精液都应该保存在15-20度，当精液的