- 1、本文档共51页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
生药鉴定显微 课件
第四节 显微鉴定 ;一、显微鉴定的常用方法;切片类型;解离组织片:可用氢氧化钾法,使细胞间质溶解,细胞分离后观察目的物。
表面片:叶、花、果实、种皮等多用,可观察各部位的表皮特征。;粉末片:
水合氯醛透化片;
水合氯醛不透化片;
醋酸甘油片或稀甘油片或水装片。
磨片:观察矿物药,相当于固定 片。
;(十四)中成药显微鉴别要点 ;生药的粉末鉴定研究对于中成药的科学鉴定有重要作用。
1.了解组方生药、剂型和制法
熟悉处方中组成药物的显微特征是中成药鉴别的基础。
中成药的显微鉴别要比中药材粉末鉴别复杂得多,制备方法及辅料等会产生一定的影响和干扰。 ;2. 根据处方明确专属特征
中成药显微鉴定,一般根据处方,对各组成生药粉末特征作分析比较,选取各药具专属性的显微特征,作为鉴别依据。;六味地黄丸是由熟地黄、山茱萸、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻六味药组成,每味药都有数个显微特征,大部分特征又有横向类别的交叉。选取六味药各具专属性的显微特征,这样六味药物均可鉴别。;三、扫描电镜等的应用 ;偏振光显微镜;例如:
淀粉:在偏光显微镜下呈现黑十字现象,不同类型的淀粉其黑十字形象不同;
草酸钙结晶:类型多样,在偏光显微镜下呈不同的多彩颜色;;石细胞:在植物体内广泛分布,其细胞壁在偏光显微镜下呈亮黄色或亮橙黄色;
纤维、导管、矿物类物质:在偏光显微镜下则呈强弱不同的色彩;
动物的骨碎片、肌纤维、结晶状物、毛茸等也呈现出不同的偏光特性。 ;;麝香仁(显微);2.扫描电子显微镜(扫描电镜)
扫描电镜分辨率高,放大倍率5倍~10万倍,能使物质的图像呈现显著的表面立体结构(三维空间)的特征,观察的样品制备操作又较简易,所以在生药鉴定,特别在同科属种间的表面结构的鉴别比较上,成为一种新的手段。 ;扫描电镜下的细菌;第五节 理化鉴定 ;理化鉴定;常用的理化鉴定方法 ;多在试管中进行,或在生药切面或粉末上滴加各种试液,观察呈现的颜色以了解某成分所存在的部位。
沉淀反应:
利用生药某些化学成分能与某些试剂产生特殊的沉淀反应来鉴别。
泡沫反应和溶血指数的测定;微量升华
利用中药中所含的某些化学成分,在一定温度下能升华的性质,获得升华物,在显微镜下观察其结晶形状、颜色及化学反应作为鉴别特征。 ;显微化学反应(microchemical reaction)
将生药的干粉、切片或浸出液少量,置于载玻片上,滴加某些化学试液,使产生沉淀或结晶,在显微镜下观察反应结果;或观察所产生的特殊颜色。
;荧光分析
利用生药中所含的某些化学成分,在紫外光或自然光下能产生一定颜色的荧光性质进行鉴别。
例如
黄连饮片显黄色荧光;
浙贝母粉末显亮淡绿色荧光;
大黄粉末显深棕色荧光。;色谱法
常用以下三种色谱法:
薄层色谱法(TLC)
气相色谱法(GC)
高效液相色谱法(HPLC) ;分光光度法
紫外分光光度法
可见分光光度法
红外分光光谱法
原子吸收分光光度法 ;第六节 DNA分子标记鉴定 ;生药鉴定常用的DNA分子标记方法 ;二、DNA遗传标记技术的方法及原理;用放射性同位素标记的DNA探针检测与被标记DNA相关的片段,构建多态性图谱。
该方法试验步骤繁琐(包括southern转移、探针标记、杂交、检测等),又受到探针来源的限制,所需DNA样品量大。 ;2.聚合酶链式反应(PCR,Polymorase chain reaction)
PCR技术是20世纪80年代中期发明的一种模拟体内DNA复制过程的体外酶促合成特异性核酸片段技术,又称无细胞分子克隆技术。 ;该方法操作简便、快速、特异、灵敏,不需提纯,不需使用同位素、省去了基因克隆步骤、对植物材料要求不严、用量少;
但该技术所需的一对引物设计,需要知道物种的遗传信息,因而在生药研究中具有一定的局限性。 ; 聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是1985年美国Cetus公司 Kary Mullis等建立的必威体育精装版生物技术。; 二、PCR的原理
1. PCR扩增首先需要一对引物,根据待扩增区域两端已知序列合成两个与模板DNA互补的寡核苷酸引物(一般长15~30bp),这一单链引物序列将决定扩增片段的特异性和片段长度。
2. PCR反应体系由基因组DNA、一对引物、dNTP、TaqDNA聚合酶、酶反应缓冲体系及必需的离子浓度等组成。; 3. 基本过程是:
A. 变性:加热(93℃~95℃ ),使基因组双链DNA变性为单链;
B. 退火或称复性 :通过降低温度(50℃~70℃),使特异性引物与互补的DNA序列特异性结合;
C. 延伸 :发生了互补结合的引物在耐高温(70
文档评论(0)