抗菌药物敏感试验及细菌耐药性检ppt课件.ppt

E test 法特点 优点 连续浓度梯度，与琼脂稀释法相关性好（相关系数为0.9）.可测MIC。 操作简单，影响因素少，稳定性高。 缺点：E试条较昂贵; 不适用于生长缓慢的苛养菌。 用于病原菌尚未确定的急、重症感染的经验治疗,以扩大病原治疗的覆盖面 治疗多种细菌所引起的混合感染 对于某些耐药菌可取得协同抗菌作用 减少或推迟治疗过程中细菌耐药性的产生 避免药物达到毒性剂量。 四、联合药物敏感试验 联合药物意义 增强作用：两种抗生素联用的效果大于它们单独使用时的效果之和； 20％～25％ 相加作用：它们联用时的效果等于单用两种抗生素效果之和； 60％～70％ 无关作用：两种抗生素联用的效果，仅相当于其中一种具有较强作用的抗生素的效果； 拮抗作用：两种抗生素联用时的效果反而小于它们分别使用时的效果之和。 10％～15％ 两种药物的联合使用的效果 两种抗菌药物作用部位不同： β－内酰胺类抗生素（抑制细菌细胞壁合成）与氨基糖苷类抗生素（干扰细菌的代谢）。 增强作用：增加了药物进入细菌细胞 杆菌肽（降低细胞通透性）与氨基糖苷类药物（干扰细菌的代谢）。 拮抗作用：降低了药物进入细菌细胞 抗菌药物协同作用发生原理 棋盘稀释法 利用肉汤稀释法原理，依据两种药物的MIC， 以棋盘设计两种药物不同浓度的组合。 计算抑菌浓度指数（fraction inhaibitory concentration,FIC) 联合药物敏感试验方法 棋盘稀释法 首先分别测定拟联合的抗菌药物对检测菌的MIC。 药物最高浓度为MIC的2倍，对倍稀释。 两种药物的稀释分别在方阵的纵列和横列进行，这样在每管（孔）中可得到不同浓度组合的两种药物混合液。 接种菌量为5×105CUF／ml，35℃孵育18h后观察结果。 计算部分抑菌浓度（FIC）指数。 抑菌浓度指数（FIC） FIC ＝ A药联合时的MIC A药单测的MIC B药联合时的MIC B药单测的MIC ＋ FIC ﹤0.5为协同作用； 0.5～1为相加作用； 1～2为无关作用； ﹥2 为拮抗作用 A药： 32 16 8 4 B药: 16 8 4 2 生长 生长 生长 生长 生长 生长 生长 生长 生长 生长 生 长 药敏试验方法的比较 K-B法： WTO推荐使用的最简单的定性药敏试验。 稀释法：准确测定MIC、 MBC，比较繁琐， 试管法一般不作为常规试验。 微生物自动分析系统采用微量稀释法原理。 E试验：可测定MIC。 第二节 结核分枝杆菌的药敏试验  （了解） 首次分离的分枝杆菌需做药敏试验，有助于合理用药和监测药物敏感性。 另外经过三个月正规治疗，标本分离培养仍为阳性患者，或感染的严重疾患（如播散性结核病和结核性脑膜炎）。 以及来自高耐药流行区的患者，均须做体外药敏试验。 四种方法 比例法 放射同位素法 绝对浓度法 耐药率法 直接法：直接采用图片阳性的体液标本。（须经充分消化五杂菌） 间接法：经分离纯培养后的次代培养菌。 无药 药2 药3 药1 Middlebrook7H10琼脂 培养3周 间接比例法（WHO推荐） 敏感：含药格无结核杆菌生长， 或菌落数﹤1%对照格 耐药：含药格菌落数≧1%对照格。 不含药的对照格菌落数应为50~150 4 格平板 分枝杆菌微量直视 快速药敏试验法 4000 倍 培养72h观察结果 INH敏感 RFP耐药 阳性对照 阴性对照 第三节 厌氧菌体外药敏试验 （了解） 厌氧菌感染多为内源性感染，厌氧菌药物敏感性稳定，一般不做体外药敏试验。 下述情况应考虑药敏试验： 明确厌氧菌引起的严重感染； 已确证的厌氧菌感染，经验性选药治疗未能奏效； 需长期用药的厌氧菌感染。 基本原理和方法与需氧菌相同，只是在培养基、操作环境和培养条件等应根据厌氧菌的特定需要变动。 培养基为布氏血琼脂再加人补充剂 5μg/ml氯化血红素，5％脱纤维羊,1μg/ml Vit K。 厌氧孵育条件 质控菌株为脆弱类杆菌ATCC25285。 厌氧菌体外药敏试验 药敏试验结果的临床价值 影响抗菌药物临床疗效的因素很多，据报道药敏试验结果与临床疗效的符合率约