病原菌的抗原检测-浙江大学.PPT

* 细菌感染的诊断与防治 林旭瑷 副教授 浙江大学医学院 细菌学诊断常通过直接通过分离出病原菌达到疾病诊断的目的。 也可通过检测病原菌的抗原成分、代谢产物或其核酸达到诊断目的。 细菌学诊断 （一）检出病原 （二）病原菌的抗原检测 血清学诊断 一、细菌性感染的诊断 标本的采集、运送和处理 尽早采集、迅速送检 标本采集必须无菌操作 选择病变明显部位采集标本 血清抗体检测采双份血：病初、恢复期 标本采集后及时送检，不能及时送检必须注意标本的保温、保湿 （一）检出病原 （二）病原菌的抗原检测 方法： 沉淀反应 协同凝集试验 免疫荧光法 对流免疫电泳 另外: McAb(特异性和敏感性) 酶免疫测定（EIA） 胶体金标记等 核酸杂交技术 PCR技术 ＊常用的血清学诊断试验 凝集试验：肥达反应 沉淀试验：RPR、VDRL 补体结合试验：检测Q热柯克斯体 中和试验：抗O试验 ELISA：检测炭疽芽胞杆菌保护性抗体 主要适用于抗原性较强的病原和病程较长的传染病的诊断 特异性抗体检测 凝集试验 ELISA 补体结合 琼脂扩散 血清学试验（双份血清） 标本采集 形态、染色检查 革兰染色 抗酸染色 特殊染色 显微镜检查 细菌成分检测 抗原检测 IF ELISA 凝集试验 细菌毒素检测 鲎试验 免疫学试验 动物实验 核酸检测 PCR 核酸杂交 基因测序 标本直接检查 增菌、分离与纯培养 分离培养与鉴定 形态学 培养特性 生化试验 血清学鉴定 药敏试验 动物试验 致病菌的检验程序 特异性防治是应用获得性免疫的原理给机体注射或服用病原微生物或特异性抗体，以达到预防和治疗疾病的目的，这种方法称为人工免疫 人工免疫分人工自动免疫和人工被动免疫。 用于人工主动免疫方法通常称为预防接种或疫苗（vaccination）接种。 人工被动免疫则用于应急预防或治疗某些疾病 二、细菌感染的特异性防治 抗感染防治原则 控制传染源 隔离和治疗病人，及时发现带菌者，消灭带菌动物 切断传布途径 注意个人卫生和防护，防止交叉感染； 做好医疗器械的消毒灭菌，防治医源性感染； 保护水源、管好粪便、加强食品卫生监督； 净化空气； 提高人群免疫力 获得性免疫的产生的方式 自然主动免疫：患病、隐性感染 主动免疫 人工主动免疫：接种疫苗、类毒素等 自然被动免疫：通过胎盘、初乳 被动免疫 人工被动免疫：注射抗毒素、丙种球蛋 白、转移因子 （一）人工主动免疫 人工主动免疫是人为地将疫苗或类毒素接种于人体，使机体主动产生特异性免疫力的过程。是一种防治微生物感染的措施，主要用于预防。 常用的人工自动免疫制剂有： 疫苗/类毒素 一）疫苗 1 死疫苗： 用理化方法将免疫原性强的细菌杀死制成的。 百日咳、伤寒、霍乱、斑疹伤寒、流行性脑膜炎、钩端螺旋体病 2 活疫苗： 用减毒或无毒的病原体制成 BCG、鼠疫和炭疽等的疫苗 活疫苗与死疫苗的比较 活疫苗 死疫苗 接种次数 1次 2-3次  接种量 小 较大 接种反应 轻 重 免疫效果 较好,维持1-5年 差,维持0.5-1年 毒力回升 有可能 不可能 安全性 有潜在危险性 安全性好 疫苗稳定性 相对不稳定 相对稳定 保存 不易保存 易保存 3 基因工程疫苗 将编码有效抗原组分的目的基因插入适当载体,形成重组DNA, 再导入宿主细胞, 目的基因随重组DNA复制而复制, 随宿主细胞分裂