质谱技术简介及其在医学检验中的应用ppt课件.pptx

质谱技术简介及其在医学检验中的应用 ;质谱 ? 光谱;准确 快速 高通量 微量 检测成本低 能够分析分子结构;;;质谱仪是按照离子的质荷比(m/z)不同,来分离不同分子量的分子.测定分子量进行成分和结构分析. 离子的生成方式有失去或捕获电荷(如:电子发射,质子化或去质子化);计算机数据 处理系统;;离子源和质量分析器的真空度需保持在 10–4 ~ 10–5 Pa和10–5 ~ 10–6 Pa。 因为： 大量氧会烧坏离子源的灯丝； 用作加速离子的几千伏高压会引起放电； 引起额外的离子－分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化。;在不破坏真空度的情况下，使样品进入离子源。 气体可通过储气器进入离子源。 易挥发的液体，在进样系统内汽化后进入离子源。 难挥发的液体或固体样品，通过探针直接插入离子源。;Sample Introduction: （直接进样杆）Direct Insertion Probe (DIP);Sample Introduction:Gas Chromatogram-MS (GC-MS);Sample Introduction:Liquid Chromatogram-MS (LC-MS);;◆ 质量分析器是质谱计的核心;检测记录系统;电子轰击电离 Electron Impact Ionization, EI 化学离子化 Chemical Ionization, CI 场电离，场解吸 Field Ionization FD, Field Desorption FD 快原子轰击 Fast Atom Bombardment, FAB 基质辅助激光解析电离 Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization, MALDI 电喷雾电离 Electrospray Ionization, ESI 大气压化学电离 Atmospheric Pressure Chemical Ionization, APCI ;;电子轰击电离又称为电子轰击，或电子电离。是应用最 普遍，发展最成熟的电离方法。;;MALDI技术中基质的作用; C: MALDI 激光解吸附离子源 Matrix-Assisted laser Desorption/Ionization;常用基质;常用基质结构; MALDI的优缺点;D: ESI离子源Electrospray Ionization;NANO-ESI喷雾照片;ESI特点;ESI优缺点;质谱计质量分析器的主要技术指标 ;例:有质量数为200和201的两峰，使之正好分开（满足10%谷的要求），需要仪器的分辨率达到： ;不同分辨率谱图效果;3、灵敏度：仪器对样品在量的方面的检测能力。 绝对灵敏度：在记录仪上得到可检测的质谱信号所需的样品量(g)； 相对灵敏度：可检测到的微量??质的最小浓度(如μg·ml-1)。； ;;根据质量分析器的工作原理，常见的质谱仪可以分为：;E=U·z=1/2mv2 和 t=L/V E：离子在加速电场获得的动能; U：加速电场电压 z：离子所带电荷; m：离子质量 v：离子飞行速度; L：飞行管道长度 t：离子飞行时间; c：常数 质量分析范围：500Da---100KDa;;;应用MALDI-TOF-MS技术 鉴定和分类微生物;一个单四极杆质谱仪;四极杆质量过滤器;四极杆质量过滤器如何工作的？;空间串联多级质谱：QQQ;QQQ多级质谱：多反应监测;三重四极杆: SRM 或MRM;;;;常见IMD的分类;苯丙酮尿症;临床表现 1.生长发育迟缓 除躯体生长发育迟缓外，主要表现在智力发育迟缓。表现在智商低于同龄正常儿，语言发育障碍尤为明显，这些表现提示大脑发育障碍。 2.神经精神表现 由于有脑萎缩而有小脑畸形，反复发作的抽搐，但随年龄增大而减轻。肌张力增高，反射亢进。常有兴奋不安、多动和异常行为。 3.皮肤毛发表现 皮肤常干燥，易有湿疹和皮肤划痕症。由于酪氨酸酶受抑，使黑色素合成减少，故患儿毛发色淡而呈棕色。 4.其他 由于苯丙氨酸羟化酶缺乏，苯丙氨酸从另一通路产生苯乳酸和苯乙酸增多，从汗液和尿中排出而有霉臭味（或鼠气味）。;病因学： ;临床上表征： ;;;;血液中升高的酪氨酸水平可源于三种酪氨酸代谢遗传疾病。 酪氨酸血症I 型于1957 年被报道，由于缺乏延胡索酰乙酰乙酸水解酶（FAH）所致