《厌氧性细菌 》课件.ppt

（三）微生物检查 1.培养基和试剂 培养基： 庖肉培养基、卵黄琼脂培养基、明胶磷酸盐缓冲液。 试剂： 肉毒分型抗毒诊断血清、胰酶（活力1:250）、革兰氏染色液。 另需实验动物（小白鼠）。 检 样 毒素检测 增菌、产毒培养 30℃，5 d 报告 （一） 毒素检测 报告（二） 分离培养 培养检查 毒素检测 报告（三） 增菌产毒培养 30℃，5 d 观察生长性状， 染色镜检 观察菌落性状 染色镜检 ①报告(一)：检样中有无肉毒毒素以及有何型肉毒毒素。(如仅为了肉毒中毒诊断，即可结束检验) ②报告(二)：对增菌产毒培养物，一方面做生长特性观察，同时检测肉毒毒素。报告检样中有无肉毒梭菌以及有何型肉毒梭菌。（有些样品如土壤、泥沙等基本上不可能含有毒素，则应从培养着手） ③报告(三)：欲获纯菌株，可用增菌产毒培养物进行分离培养，对所得纯菌株进行形态、培养特性等观察及毒素检测，其结果可证明所得纯菌为何型肉毒梭菌。（一般情况下，没有必要从检样中分离纯的菌株，但研究或特殊需要例外） 2、检验程序 ①肉毒毒素检测 注射液中若有肉毒毒素存在，小白鼠一般多在注射后24 h内发病、死亡。 液态或固体（明胶磷酸盐缓冲液）样品经过适当处理后离心，取上清液实验 上清液及其胰酶激活处理液 分别进行小白鼠腹腔注射，各3只，每只0.5 mL，观察4 d 确证试验 毒力测定 定型试验 取庖肉培养基三支，煮沸10min～15min，做如下处理： 第一支：急速冷却，接种检样均质液1 mL～2 mL； 第二支：冷却至60℃，接种检样，继续于60℃保温10 min，急速冷却； 第三支：接种检样，继续煮沸加热10 min，急速冷却。 以上3支试管于30℃厌氧培养5d，若无生长，可再培养10d。培养到期，若有生长，取培养液离心，以其上清液进行毒素检测试验，方法同上，阳性结果证明检样中有肉毒梭菌存在。 ②肉毒梭菌的检出（增菌产毒培养试验） 选取证实含有肉毒毒素的增菌产毒培养物（必要时可重复一次适宜的加热处理）接种卵黄琼脂平板，35℃厌氧培养48 h。肉毒梭菌在卵黄琼脂平板上生长时，菌落及周围培养基表面覆盖着特有的虹彩样(或珍珠层样)薄层，但G型菌无此现象。 根据菌落形态及菌体形态挑取可疑菌落，接种庖肉培养基，于30℃培养5d，进行毒素检测及培养特性检查确证试验。 ③分离培养 （1）毒素检测：试验方法同上。（2）培养特性检查：接种卵黄琼脂平板，分成两份，分别在35℃的需氧和厌氧条件下培养48 h，观察生长情况及菌落形态。肉毒梭菌只在厌氧条件下生长而在需氧条件下不生长。 3、结果报告 报告(一)：检样含有某型肉毒毒素。报告(二)：检样含有某型肉毒梭菌。报告(三)：由样品分离的菌株为某型肉毒梭菌。 肉毒梭菌检验目标主要是毒素，不论食品中的肉毒毒素检验还是肉毒梭菌检验，均以毒素的检测及定型试验为判定的主要依据。 （四）防治原则 食品进食前加热煮沸 加强相关食品的卫生监督和管理，发病后尽早注射肉毒多价抗毒素:BAT 防止芽胞发芽 临床应用 毒素除皱 在了解了毒素的结构与功能以及作用机制后，人类开始用毒素来作为有效药物。肉毒毒素被助恶治疗眼睑痉挛、痉挛性斜颈、痉挛性发音困难等疾病。 1992年有人尝试将肉毒杆菌毒素注射除皱法引进到美容医学的治疗上，就是我们所说的除皱术。肉毒杆菌除皱术也称为生物素除皱，肉毒杆菌A的商品名为“Botox”。 美容界这阵子的大热门肉毒杆菌(Botox)可说是一种既不费时又不用开刀的整型治疗，这让许多爱美人士都跃跃欲试， 英国版ELLE报导，对于演艺娱乐界来说，任何的整容都已经过时，新世纪最流行的是自然的长相。 “肉毒杆菌素”是肉毒杆菌所分泌的毒素。它的作用是可以阻断神经末梢分泌能使肌肉收缩的「乙酰胆碱」，达到使肌肉麻痹的效果。 “肉毒杆菌素”，在美容方面，主要是用来去除动态的皱纹（如皱眉纹、鱼尾纹、抬头纹）及改善国字脸及萝卜腿。 肉毒杆菌祛皱原理 动态皱纹产生的原因： 常见的动态皱纹包括：额头纹、鱼眼纹、脸颊纹以及颈纹。常常我们会发现，在我们不做面部表情的时候，一般动态皱纹是无法体现的，而当笑脸或者是睁眼等其它面部肌肉活动的时候，就产生了动态皱纹。而出现这些情况的因素包括先天性因素、衰老、皮肤松弛以及后天性养成（例如痤疮疤痕导致的面部纹理）。 去除动态皱纹的原理，是将收缩造成皱纹的肌肉麻痹掉，使肌肉不收缩，连带的也去除了皱纹。一般在注射后三、四天就可以看到效果，一周后效果就很明显。效用期约三至六个月，平均四个月。若皱纹再出现，视个人需要，可重复施打。 改善国字脸及萝卜腿的原理，是让肥厚的肌肉不收缩，进而导致萎缩，达到瘦脸及瘦