实验八影响神经冲动传导因素观察.ppt

动作电位传导速度的测定Measurement of Conduction Velocity of AP * 实验八：影响神经冲动传导的因素观察 实验目的： 1．继续学习蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法， 掌握坐骨神经标本的制备方法。 2．引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波 形（包括双相和单相动作电位）。 3．学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原 理和方法。 4．设计改变细胞外液的某些因素会对动作电位在神经干上传导的速度产生何种影响？ 实验原理： 用电刺激神经，在刺激电极的负极下神经纤维膜内产生去极化，当去极化达到阈电位，膜上产生一次可传导的快速电位反转，即动作电位 一条神经干中有无数条神经纤维，每条神经纤维的直径和长度不同，膜特性也不完全一样，故兴奋性不同、阈值各异，而本实验记录到的动作电位是神经干中各条神经纤维动作电位的复合表现，故随着刺激强度的增大动作电位幅度也增大。 如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波先后通过两个电极处，便引导出两个方向相反的电位波形，称双相动作电位 如果两个引导电极之间的神经纤维完全损伤，兴奋波只通过第一个引导电极，不能传至第二个引导电极，则只能引导出一个方向的电位偏向波形，称单向动作电位 双相动作电位 Biphasic Action Potential 兴奋区 细胞外引导电极 检流计 单相动作电位Monophasic Action Potential 损伤区 兴奋区 细胞外引导电极 检流计 刺激伪迹(Stimulus artifact) 刺激伪迹 AP 刺激器 放大器 + － 地 刺激电流 i- i+ R+ R- 地 刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成的电位差信号。 － + S Δt ?传导速度测定??υ=? SAC Δt 刺激器 输入通道 R1- Rr1+ R2- R2+ 实验动物与器材 蟾蜍或青蛙、神经标本屏蔽盒、电子刺激器、示波器或计算机生物信号采集处理系统、普通剪刀、手术剪、眼科镊（或尖头无齿镊）、金属探针（解剖针）、玻璃分针、蛙板（或玻璃板）、蛙钉、细线、培养皿、滴管、双凹夹、培养皿、滤纸片、带电极的接线若干、锌铜弓，酒精灯、温度计、任氏液、1.5倍氯化钾任氏液、0.5倍氯化钠任氏液。 实验方法与步骤： 1. 神经－肌肉标本的制备 2. 坐骨神经标本的制备 3．仪器及标本的连结 4．观测和测定双相动作电位 （1）缓慢增大刺激强度，观察动作电位波形的变化。读出波宽为某一数值时的阈刺激。 （2）仔细观察双相动作电位的波形，读出最大刺激时双相动作电位上下相的振幅和整个动作电位持续时间数值。 5．观察单相动作电位 用镊子将两个引导电极r1,r1’之间的神经夹伤，再刺激时呈现的即是单相动作电位。 6．动作电位传导速度的测定及影响因素的观察 换一根坐骨神经，搭放在神经屏蔽盒的电极上。给予神经干最大刺激强度，可在两个通道中（或示波器的上、下线）观察到先后形成的两个双向动作电位波形。 （1）分别测量从刺激伪迹到两个动作电位起始点的时 间，设上线为t1，下线为t2(或可直接测量两个动 作电位起点的间隔时间)，求出t2～t1的时间差值。 （2）测量标本屏蔽盒中两对引导电极相应的电极之 间的距离d(即测定r1～r2的间距)。 （4）参照上步操作可自行设计改变细胞外液的某些因 素，如分别将神经干标本置于25℃的任氏液、高 钾和低钠任氏液中浸泡5 min后，再测定神经冲动 的传导速度。 （3）将神经干标本置于4℃的任氏液中浸泡5 min后， 再测定神经冲动的传导速度。 *