实验五肠道杆菌.ppt

  1. 1、本文档共12页,可阅读全部内容。
  2. 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
实验五肠道杆菌

实验五 肠道杆菌 实验内容 操作 肥达试验 示教 粪便肠道致病菌的分离和鉴定 实验目的 熟悉肥达试验的操作方法、结果观察及分析 熟悉肠道杆菌在选择鉴别培养基上的生长特点 了解粪便标本肠道杆菌的分离鉴定 肥达试验(Widal Test) 原理:用已知伤寒沙门菌O、H抗原,以及甲型副伤寒、肖氏沙门菌、希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验,测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。 用途:辅助诊断伤寒,副伤寒 方法: 取小试管32支,分成4排,每排8支,依次标号。 于小试管内各加入0.5ml生理盐水。 在每一排第1管中各加患者血清0.5ml,吸打混匀,吸取0.5ml 加入第2管作对倍稀释……依次稀释至第7管弃去0.5ml ,第8管为对照。2~3排按同法稀释。 按8.7.…1列的顺序,分别对第1排各管加入伤寒H抗原0.5ml ;第2排各管加入O抗原0.5ml ;同样对第3排各管加甲型副伤寒(PA)H抗原0.5ml ;第4排各管加乙型副伤寒(PB)H抗原0.5ml 。 将各管混匀,置37℃水浴箱中16~18小时后观察结果。 肥达试验结果观察 根据凝集反应的强弱,分别以“++++、+++、++、+”记录: ++++:液体清澈透明,菌体全部被凝成块,沉于管底。 +++:液体较透明,大部分菌体被凝集而沉于管底。 ++:液体稍透明,管底有少量凝集沉淀物。 +:液体较混浊,可见极少量凝集物。 -:液体混浊,细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点(与对照管相似)。 血清效价(或滴度):能与一定量的抗原发生肉眼可见的明显凝集(即“++”凝集)的血清最高稀释倍数,称为血清的效价。血清的效价代表着血清中抗体的含量,其效价愈高,所含抗体的量愈多。如血清最低稀释倍数(1∶40)仍无凝集,则视为阴性或效价低于1∶40;如血清的最高稀释倍数(1∶1280)仍完全凝集,则示血清效价高于1∶1280。 粪便标本肠道杆菌的分离鉴定 SS平板-分离肠道病原菌的强选择培养基 成分和作用: 基础培养基:提供氮源和碳源 胆盐、枸橼酸钠、煌绿:可抑制肠道非致病菌的生长,而对肠道致病菌抑制作用弱。 乳糖,中性红(pH6.8-8.0,红→橙黄) :致病菌不分解乳糖,但分解蛋白胨产生碱性物质→菌落淡黄色;大肠杆菌分解乳糖产酸,菌落呈红色 病原菌:小,无色,半透明 非致病菌:大,红色 EMB(Eosin Methyl Blue)平板-分离肠道病原菌的弱选择培养基 成分和作用: 基础培养基:提供氮源和碳源 伊红、美蓝:可抑制肠道非致病菌的生长,而对肠道致病菌抑制作用弱。 乳糖,伊红、美蓝:致病菌不分解乳糖→菌落无色半透明;大肠杆菌分解乳糖产酸,菌落呈紫黑色 病原菌:半透明,无色 非致病菌:紫黑色 克氏双糖铁培养基 接种方法 如何观察 上层含乳糖部分 乳糖发酵:致病菌红色,非致病菌黄色 H2S 然后观察下层 发酵葡萄糖(产酸产气) 动力 * 克氏双糖铁 培养基 尿、靛、动 培养基 分析结果 SS 平板 EMB平板 挑取可疑菌落 玻片凝集试验 粪便 乳糖 硫酸亚铁 固体 葡萄糖 半固体 指示剂:酚红 *

文档评论(0)

189****7685 + 关注
实名认证
内容提供者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档