温阳消饮法对胸腔积液大鼠肾脏aqp2及camp-pkapkc信号通路表达的影响-effect of wenyang xiaoyin method on aqp 2 and camp - pka pkc signal pathway expression in rats with pleural effusion.docx

成都中医药大学 2015 届硕士学位论文 万方数据 摘要 目的：观察温阳消饮法对胸腔积液模型大鼠肾脏水通道蛋白 2 表达的影响，探 究该法治疗水饮病的部分作用机制。 方法：将 Wistar 大鼠 40 只，随机分为 W 组（温阳消饮组），Q 组（去桂消饮 组），M 组（模型对照组），K 组（空白对照组）。向 W、Q、M 组大鼠胸腔 注射 1%λ-角叉菜胶，制备胸腔积液（悬饮）模型。造模 24 小时后拍摄 X 线平 片显示造模均成功。于造模 2h 后给予 W 组苓桂术甘汤合葶苈大枣泻肺汤药液灌 胃，Q 组苓桂术甘汤合葶苈大枣泻肺汤去桂枝药液灌胃，每天 1 次，连续 5 天。 M、K 组，仅正常喂食供水。造模后第 5 天处死各组大鼠，采集胸腔积液及肾脏 组织，用蛋白印迹法检测肾脏 AQP2 的表达，用 ELISA 法检测肾脏 PKA、PKC、 cAMP 的含量。 结果：（1）胸腔积液量：与空白对照组比较，各组胸腔积液量均增加(P＜0.05)； 与模型对照组比较，去桂消饮组、温阳消饮组胸腔积液量减少（P＜0.05)，与去 桂消饮组比较，温阳消饮组胸腔积液量较多，但不具有统计学意义（P0.05)。 （2）肾脏水通道蛋白2表达：与空白对照组比较，模型对照组表达降低(P＜ 0.05)；与模型对照组比较，温阳消饮组、去桂消饮组表达均升高(P＜0.05)；与去 桂消饮组比较，温阳消饮组表达虽有升高，但不具有统计学意义(P＞0.05)。 （3）肾脏PKA含量：与空白对照组比较，温阳消饮组、去桂消饮组PKA含 量增加(P＜0.05)；其余各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。 （4）肾脏PKC、cAMP含量：与去桂消饮组比较，温阳消饮组cAMP增加(P ＜0.05)；其余各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。 （5)肾组织超微结构：与空白对照组比较，模型对照组肾组织超微结构的异 常变化明显；与模型对照组比较，温阳消饮组、去桂消饮组肾组织超微结构的异 常变化较轻，温阳消饮组与空白对照组的肾超微结构几乎无差异。 结论：（1）温阳消饮法代表方、去桂消饮方均能有效减少λ-角叉菜胶所致胸腔 积液模型大鼠胸腔积液量。 （2）λ-角叉菜胶所致胸腔积液模型大鼠的肾组织AQP2表达降低，温阳消饮 I  法代表方、去桂消饮方均能上调胸腔积液模型大鼠肾组织AQP2的表达，这可能 与该???治疗胸腔积液大鼠的作用机制有关。 （3）温阳消饮法代表方、去桂消饮方均能够增加λ-角叉菜胶所致胸腔积液模 型大鼠肾组织 PKA 的含量、进一步调控 AQP2，从而增加肾脏对水液的重吸收 作用，这可能与其治疗胸腔积液模型大鼠的作用机制有关。 （4）温阳消饮法代表方、去桂消饮方对λ-角叉菜胶所致胸腔积液模型大鼠肾 组织 PKC、cAMP 无明显影响作用。 （5）λ-角叉菜胶所致胸腔积液模型大鼠肾组织超微结构存在变化，温阳消饮 法代表方、去桂消饮方对该模型大鼠肾组织的异常变化具有良性、促进恢复的作 用，尤以温阳消饮法代表方更加明显。 关键词：温阳消饮法；胸腔积液；大鼠；肾脏；水通道蛋白 2 I  ABSTRACT Purpose：To explore the correlation pleural effusion removal by warming Yang to resolve fluid-retention therapy and expression of aquaporin 2 in kidney ，to reveal its possible mechanism of water metabolism . Methods ： 40 healthy adult Wistar rats were randomly divided into four groups including the yang-warming and fluid retention-resolving therapy group (W), wiping off the cassia twig fluid retention-resolving group(Q), model control group(M) and bank control group (K), The pleural effusion mold was formulated by 1% Carrageenan injection and was evaluated by X-ray irradiation. The treatment was applied in two hours after molding for incessant 5 days by once a day.The blank control group