ACQUITY UPLC SQ MS-操作规程.docVIP

ACQUITY UPLC SQ MS 操作规程 1 在桌面上找到MassLynx V4.1图标，双击打开。 2 在MassLynx窗口，正中为待测样品列表，每天第一个仪器使用者，请先将列表文件保存为以当天日期命名的*.SPL文件。具体操作为：在窗口最上方File 下拉菜单中单击Save As，在弹出对话框file name处输入当日日期，如2012_06_29，将其存为*.SPL文件。 3 在样品列表中正确填写待测样品信息： 在File Name 一栏中填写待测样品名称或编号； 在File Text中填写样品相关信息，如送样日期、样品所属项目号等，也可不填； 在Ms File中选择合适的质谱文件，包括选择质谱离子源、谱图采集质量范围和正负态。具体操作为：选中所要填写单元格，单击鼠标右键，单击Browse，在弹出窗口中选择合适文件； 注：A在样品信息缺乏的情况下，可以选择常用文件ESI150-800+-，该文件名中ESI为电喷雾离子源；150-180为质量采集范围（m/z）在150到800之间；+-为该方法在测试过程中可同时采集正离子及负离子相关信息，将得到正态和负态两张谱图。 B 大约90%的样品可以用ESI源电离，若为弱极性物质（如脂类物质）则APCI（大气压化学电离）源容易使其电离。 C 不建议擅自改动方法，若有需要，请联系仪器管理人员。 在Inlet File中选择合适的液相色谱文件，选择方法与Ms File的选择相同。最常用的文件有三个，分别对应小极性、中极性和大极性化合物。 若化合物易溶于甲醇、乙醇、水等大极性溶剂，可选择文件：5%_10%_40%_95%_4min； 若化合物易溶于乙酸乙酯、二氯甲烷等中等极性的溶剂，可选择文件：5%_60%_95%_4min；该方法为最为常用的方法，可以用于大部分样品的分离。 若化合物极性较小，可选择文件：5%_85%_95%_4min； 注：A 若化合物易溶于石油醚中，则易与C-18柱结合，不宜洗脱，最好采用直接进样方式，进行质谱测试。 B 若样品易溶于水，则不易与C-18柱结合，会不经柱分离直接冲出；为了保护离子源，LC MS方法中前0.4min是不进质谱源的，将直接通过废液管排出，因此，样品有可能在此时被排入废液，而得不到检测，这时最好选择直接进样。 C不建议擅自改动方法，若有需要，请联系仪器管理人员。 在Bottle一栏中正确填写样品瓶所在位置信息，如样品放置于1号盘13号位，填写内容为1：13。 在Inject volume栏填写进样体积数，通常进样体积为0.3 μL；若样品较稀，可以进样1-2 μL；若较浓，可进0.1 μL；本仪器最大进样量为10 μL。不建议在不知样品浓度的情况下一次进样量过大，以免因样品残留造成系统污染，影响后续人员测样。 4 当样品信息填写完整后，可将MS 由standby （待机）状态调到operate（操作）状态。具体操作为：在MassLynx窗口最左边纵向菜单栏里Instrument 选项下单击Ms Tune图标 ，弹出Ms Tune窗口，其右下角为质谱状态图标。单击图标，此时，仪器状态由Standby转为Operate。相应的，仪器状态图标由红色变为绿色。 5 在MassLynx窗口上方图标处，找到氮气供应图标，单击单开氮气。 6 完成步骤4及5后，检查质谱是否工作正常。具体为：在Ms Tune界面，左半边为质谱仪器参数及状态窗口。单击ES Source，查看仪器参数设定值与实测值是否大致相符，若偏差较大，请通知仪器管理人员。 7 若质谱仪器正常，可将UPLC液相系统调整为工作状态。在使用液相之前，请先确认液相仪器上方试剂瓶中金属溶剂过滤器在色谱溶剂液面以下，若溶剂液面较低（低于100ml），请向瓶中倒入100-200ml相应溶剂，并超声脱气15min 后使用。 8 UPLC调整到工作状态，具体操作如下： A 调节流速、初始溶剂比例 在MassLynx窗口Instrument 选项下单击Inlet method图标，弹出的Inlet method窗口显示了UPLC系统的当前状态，此时，ready显示为红色。单击ACQUITY Additional Status，在该窗口正中显示有液相系统的三大模块状态。单击四元泵模块（Quaternary Solvent Manager），在弹出的对话框中将流速改为0.3ml/min，solvent A（水） 为95%；solvent B（乙腈） 为5%。 B 点亮紫外灯 在ACQUITY Additional Status窗口紫外检测器模块（PDA Detector），单击紫外灯图标，将灯点亮。 C 调节柱温箱温度 由于UPLC内部压力很大，为了减小系统压