基因工程步骤好有真原核基因区别.pptVIP

1．将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点： 易感染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力。 ②原理：Ti质粒上的T-DNA可以转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上。 仔细阅读课本将目的基因导入植物细胞 （1）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是？ （2）农杆菌如何感染植物细胞？ （3）农杆菌的Ti质粒中Ｔ－ＤＮＡ有何特点？ （4）若用农杆菌转化法应选用什么作为运载体？将目的基因插入运载体的什么部位？此时的农杆菌是受体细胞吗？ （5）获得含有目的基因的受体细胞后如何获得具有新性状的植物体？原理？ （6）农杆菌转化法和基因枪法分别适用于什么生物？ ③过程： ④优点：稳定、经济、有效 将外源目的基因插入Ti质粒的T-DNA中形成重组Ti质粒 将重组Ti质粒转入农杆菌 使含重组Ti质粒的农杆菌感染植物细胞 含目的基因的植物细胞 表现出新性状的植株 （2）基因枪法 （3）花粉管通道法 2．将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： 目的基因表达载体提纯 取卵（受精卵） 显微注射 　受精卵 　新性状动物 3．将目的基因导入微生物细胞 　　　阅读课本：早期基因工程为何选择原核生物作为受体细胞？方法？ ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法： 用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 1．获取目的基因的常用方法、PCR技术的原理、条件、过程、方式、结果。 2．人工合成目的基因的方法及过程。 3．构建基因表达载体的目的、基因表达载体的组成及各组成部分的作用。 4．基因表达载体的构建过程？将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法分别是什么？ 5．农杆菌转化法的原理（即Ti质粒的T-DNA的作用特点）、适用范围。 6．叙述用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞的过程。 复习（15分钟后黑板展示） 基因工程的基本操作程序 知识点一：1．原核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 与RNA聚合酶结合位点 启动子 终止子 启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因首端是RNA聚合酶识别和结合的部位并能驱动基因转录出mRNA。没有启动子，基因就不能转录。 终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。 ①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。 ：能转录相应的信使RNA，能 编码蛋白质 编码区 非编码区 原核细胞的 基因结构 ②有调控序列，最重要的是RNA聚合酶结合位点。 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 编码区 非编码区 非编码区 内含子 外显子 启动子 终止子 知识点一：2．真核细胞的基因结构 真核细胞的 基因结构 编码区 非编码区 外显子：能编码蛋白质 内含子：不能编码蛋白质的序列 与原核细胞相同 非编码序列： 包括非编码区和内含子 原核细胞 真核细胞 不同点 编码区是 _____的 编码区是间隔的、_____的 相同点 都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的 原核细胞与真核细胞的基因结构比较 思考 编码相同数目氨基酸的蛋白质，原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗？ 连续 不连续 编码区 非编码 1．目的基因的获取 2．基因表达载体的构建 3．将目的基因导入受体细胞 4．目的基因的检测与鉴定 基因工程基本操作的四个步骤 目的基因的获取 阅读课本第一自然段，回答以下问题： 2．获取目的基因的常用方法有哪些？ （1）从基因文库中获取 （2）利用PCR技术扩增 （3）人工合成 1．什么叫目的基因？并举例说明。 　　主要是编码蛋白质的基因，也可以是一些 具有调控作用的因子 （一）从基因文库中获取目的基因 1.基因文库：概念见课本 2.基因文库的分类:按外源DNA片段的来源分类 种类 基因组文库：含有一种生物的全部基因 部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因， 如：cDNA文库 3.基因文库的目的 　　为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因。 提取某种生物的全部DNA 用适当的限制酶切 一定大小的DNA片段 将DNA片段与载体连接 导入受体菌中储存 基因组文库 4.基因文库的构建方法 （1）直接分离法 单链互补DNA 双链cDNA片段 导入受体菌中储存 与载体连接 cDNA文库 反（逆）转录酶 DNA聚合酶 （2）反转录法：cDNA的合成流程图解 某种生物的单链mRNA 思考：