医学微生物学(第八版)第八章讲 球菌.ppt

3. 检验方法 直接镜检 （痰、脓、穿刺液、 咽拭子等） 初报：发现G+球菌， 呈链状排列 分离培养 ① 血液、脑脊液 肉汤增菌 ② 脓液、咽拭子等 血平板分离 血清学试验：抗O试验（ASO test） 原理：毒素与抗毒素的中和试验，用SLO检测血清中的ASO。 方法：间接凝集。 结果：效价＞1:400 单位有诊断意义。 意义：辅助诊断急性风湿热、风湿活动期、急性肾小球肾炎。 积极治疗儿童链球菌感染，防止发生急性肾炎和风湿热。抗生素首选青霉素：用长效青霉素预防链球菌感染，对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定效果。 (四)防治原则 广泛分布于自然界，常寄居正常人的鼻咽腔中，多数不致病，仅少数有致病力，是细菌性肺炎、脑膜炎、支气管炎的主要病原菌。 肺炎链球菌S. pneumoniae 形态与染色：G＋、矛头状、多成双排列；平面相对、尖面相背；无鞭毛、无芽胞， 有厚荚膜。 一、生物学性状 2. 培养特性 　条件：营养要求较高，兼性厌氧菌， 5-10% CO2生长最好。 产生自溶酶。 　液体：培养24h呈均匀混浊，后期因产生自溶而变得澄清。 　普通琼脂平板：不生长。 　血液琼脂平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有草绿色溶血环（α溶血） 3. 抗原构造 荚膜多糖抗原：据此将肺炎链球菌分85型，对人致病的有20多型。 Ⅰ-Ⅲ型引起大叶性肺炎。 菌体多糖抗原：种特异性，C多糖可与CRP反应，产生沉淀，在炎症活动期(如风湿热)含量增多。 M蛋白抗原：型特异性。　　 4.抵抗力 较弱，加热56℃，20min即死亡。 对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗力较强。 5.变异性 荚膜变异：有荚膜的光滑（S）型菌有毒力，失去荚膜的粗糙（R）型毒力减低或消失。 1. 致病物质 荚膜：肺炎球菌的致病力，主要是荚膜的抗吞噬作用。 蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎链球菌溶素O等 溶血毒素“O”：自溶后释放，能溶解人和动物的红细胞，高浓度对动物有坏死及致死作用。 二、致病性与免疫性 2. 所致疾病 存在于正常人上呼吸道，为条件致病菌，仅在人体抵抗力下降时才引起疾病。 可引起：大叶性肺炎，支气管炎，胸膜炎，脓胸，中耳炎，脑膜炎，败血症等。 病后可获得型特异性免疫。 三、微生物学检查 标本采集 痰液，脓液，血液，脑脊液等。 检查程序 检查方法 检验程序 痰、脓 脑脊液 血液 直接涂片 分离培养 革兰染色、美兰染色 荚膜肿胀试验 增菌培养（葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤） （血平板） 挑选可疑菌落 纯培养 初报 兔血清肉汤 小白鼠毒力试验 涂片 荚膜肿胀试验 胆汁溶菌试验 菊糖发酵 Optochin试验 药敏试验 报 告 检查方法 1、直接镜检 适用于：痰、脓、脑脊液标本。 报告：“找到肺炎链球菌” 2、分离培养 血平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有草绿色溶血环（α溶血）。 3、鉴定试验 荚膜肿胀试验 胆汁溶菌试验：+ Optochin试验：+ 菊糖发酵试验：+ 小鼠毒力试验：有毒力的菌株，接种后12-36h，死亡。 胆汁溶菌试验阳性： 加入胆汁或10%去氧胆酸钠，37℃，5-10min，激活本菌的自溶酶，出现溶菌现象。 取肉汤培养液均匀涂于血平板上用optochin纸片贴于接种区中央（或分区划线法，纸片贴于1-2区），35℃需氧培养过夜，抑菌圈 18mm。 Optochin敏感试验阳性： Optochin test 肺炎链球菌的主要鉴定依据 1、镜下形态：革兰阳性球菌，矛头状成双排列，平端相对，尖端向外； 2、血平板菌落特点：直径0.5-1.5mm，灰白色，半透明，光滑（有些菌株为粘液状），扁平，周围有草绿色溶血环。 培养或放置24h以上，菌落中央可塌陷，呈脐窝状。 3、生化鉴定：Optochin试验+，胆汁溶菌试验+。 肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的鉴别 形态 菌落 血清 胆汁 菊糖 Opto- 小鼠毒 肉汤 溶菌 chin 力试验 肺 链 甲 链 矛头状，稍大，湿润 浑浊 + + + + 成双， 扁平， 有荚膜 脐窝状 圆形， 较小，稍干 沉淀 — —