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* 酸性物质HA,使HA达到99%解离时,log [A-]/ [HA] = log 100/1 = 2 碱性物质,游离型,pH值要高2个单位,pH=pKa+2;解离型,pH值要低2个单位,pH=pKa-2 * * * * * * * 硅胶不适合碱性强的生物碱。 * * 干法上样(样品与吸附剂1:2拌样), 湿法上样(用起步溶剂溶解样品,滴加到柱上) * * * * * * * * * 画树脂结构,分类根据所连接的交换基团不同,分为阳离子和阴离子交换树脂. * 3.2 硅胶、氧化铝: ①被分离物质吸附力与结构的关系 被分离物质极性大,吸附力强,Rf值小,洗脱难, 后被洗脱下来。 官能团极性大小排列顺序: -COOH Ar-OH R-OH R-NH2, RNHR , RNR R R-CO-NRR RCHO RCOR RCOOR ROR RH 第四节 提取分离方法 3.2 硅胶、氧化铝: ②溶剂(洗脱剂)的极性与洗脱力的关系 洗脱剂极性越大, 洗脱力越强. 第四节 提取分离方法 练习: 从黄花夹竹桃果仁中分离到七种强心苷成分, 比较极性大小和硅胶柱上洗脱顺序. 名称 R R’ 黄夹苷A CHO (D-Glc)2 黄夹苷B CH3 (D-Glc)2 黄夹次苷A CHO H 黄夹次苷B CH3 H 黄夹次苷C CH2OH H 黄夹次苷D COOH H 单乙酰黄夹次苷B CH3 H 单乙酰黄夹次苷B R”=COCH3, 其它R”=H 第四节 提取分离方法 第四节 提取分离方法 答案: 1. 极性大 小:黄夹苷A>黄夹苷B >次苷D>次苷C>次苷A>次苷B >单乙酰B 2. 硅胶柱上的出柱顺序:后 先 练习: 某植物中分得3个黄酮化合物,结构如下, 比较它们的极性大小及在硅胶TLC上的Rf值大小顺序. A: R1 =R2= H B: R1 = H, R2= Rham C: R1 = Glc, R2= Rham 极性大小: SiO2-TLC Rf: 第四节 提取分离方法 极性大小: C B A SiO2-TLC Rf: A B C Polyamide TLC, Rf: C B A 第四节 提取分离方法 答案: 3.4 聚酰胺(Polyamide) 是由己酰胺聚合成的一类高分子化合物。 第四节 提取分离方法 分离原理:主要通过酰胺键与酚羟基、酸、醌等形成氢键,产生吸附作用。吸附力取决于形成氢键缔合的能力。 第四节 提取分离方法 ②溶剂的洗脱能力 水 含水醇醇 丙酮NaOH/H2O甲酰胺二甲基甲酰胺尿素/H2O 3.5 大孔吸附树脂(macro-reticular resin) ①组成: 苯乙烯,二乙烯苯和致孔剂 ②分离原理:吸附(范德华力和氢键)和分子筛作用(多孔性结构) 第四节 提取分离方法 3.5 大孔吸附树脂 ④洗脱剂: H2O 及不同比例的含水醇。 洗脱分离: H2O 洗: 糖,水溶性色素 30% EtOH/ H2O: 极性大的成分 50-75% EtOH: 皂苷类 95% EtOH: 极性小成分 ⑤应用: 除多糖, 水溶性色素, 富集苷类成分 第四节 提取分离方法 4.根据物质离解程度不同进行分离—离子交换法 固定相:离子交换树脂(聚苯乙烯高分子化合物,引 入交换基团) 分类: 阳离子交换树脂:强酸型 RSO3-H+ 弱酸型 RCOO-H+ 阴离子交换树脂:强碱型 RN+(CH3)3Cl- 弱碱型 RNH2, RNHR’, RNR’R” 第四节 提取分离方法 4.1交换原理: 阳离子交换树脂: 阴离子交换树脂: 4.2应用: 主要用于生物碱和有机酸的分离。 第四节 提取分离方法 4.根据物质离解程度不同进行分离—离子交换法 离子交换软化水处理设备 透析法: 半透膜, 分子筛滤过作用 超滤法: 分子大小不同, 扩散速度不同 超速离心法: 溶质在超速离心作用下具有不同的 沉降性或浮游性 凝胶滤过法: 分子筛的作用(凝胶渗透色谱,分子 筛滤过, 排阻色谱), 被分离物质按分子 由大到小的顺序流出色谱柱. 5.根据物质分子大小差别进行分离—凝胶滤过法 第四节 提取分离方法 5
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