爱爱医资源—免疫胶乳浊度分析在自动生化分析仪上应用.ppt

CRM470-全新的国际蛋白标准 * * CRM 欧共体参考局（ BCR ）的认可参考品。 CRM470是14种（血清）蛋白分析物的参考制品。 CRM470基于人血清（人血清蛋白参考制备物 lot 5 ，RPPHS lot 5）的Certified Reference Material 由以下组织共同发展： IFCC BCR Brussels CAP USA CRM470-全新的国际蛋白标准 * CRM 470在欧洲由BCR制备提供。在美国则由美国病理协会（CAP）提供材料。 生产厂家用CRM470对自己的定标液和质控液进行标化。 CRM和SRM（Standard Reference Material标准参考材料）可以认为是目前可以提供的最高质量的材料。SRM主要用于USA（国家标准和技术研究院NIST）。 CRM470-全新的国际蛋白标准 基于CRM470参考物的成人参考范围 CRM470参考物及其参考范围 血浆蛋白质 每个CRM470的参考范围（g/L） 白蛋白 35～52 α-1-抗胰蛋白酶 0.9～2.0 （α-1-抗胰蛋白酶抑制剂） C3C-补体 0.9～1.8 C4-补体 0.1～0.4 铜兰蛋白 0.2～0.6 C-反应蛋白（CRP） ≤0.005 α-1-酸性糖蛋白（类粘蛋白） 0.5～1.2 触珠蛋白 0.3～2.0 IgA 0.7～4.0 IgG 7～16 IgM 0.4～2.3 α-2-巨球蛋白 1.3～3.0 前白蛋白（transthyretin） 0.2～0.4 转铁蛋白 2.0～3.6 注：C3C在新鲜样本中可期望较低的参考范围 * * 对实验室的生化分析仪尽可能充分的掌握并理解。 理解各个检测项目的方法学原理。 仔细认真阅读商品化试剂的说明书。 销售商或者厂家技术部门的支持。 “所谓生化分析仪就是将实验参数输入仪器，由仪器按照试验指令来完成整个试验。参数设置，基本功在仪器之外，如果对分析化学、对酶动力学、仪器性能没有一定的掌握，是很难设置好参数的。” 在自动生化分析仪上的应用 * 免疫浊度法在生化分析仪上常见的测定（分析）方式 FINAL POINT D FINAL - SAMPLE BLANK D - A FINAL - INITIAL D - B KINETIC (C - B)/ time R2 (LATEX OR ANTISERA) SAMPLE AND R1 (BUFFER) TIME OD increment * 测定CRP分析方式 采用双试剂、两步终点法 37℃ 5min 37℃ 5min A1 A2 Sample en R1 R2 R1 R2 End * Heidelberger Kendall Experience Excess antibody zone Equivalence zone Excess antigen zone Antigen concentration TURBIDITY ( OD ) （useful zone） A B C 免疫浊度测量多点定标 依据抗原抗体反应特性，免疫比浊测量选择在A区，IC的浊度随着抗原的增加而增加，但不是呈线性的对应关系（曲线往往有截距或呈S形），要得到正确的结果，必须做一个多点定标的标准曲线。 自动生化分析仪多推荐5点或6点定标，然后选择适当的数学模型作曲线拟合，如：Logit-Log变换； y=d+cx+bx2+ax3 * * 多点定标：RF、CRP REAL RELATION AND CURVE OF CALIBRATION STRAIGHT LINE CALIBRATION (THERE IS AN ERROR) concentration OD increment * CONCENTRATION OD increment REAL RELATION STRAIGHT LINE CALIBRATION 一点定标：例如ASO 免疫浊度测量多点定标 校准曲线的选择和拟合效果检验： 选择何种校准曲线作数据处理，是试验成功的关键之一。 一般用试剂厂家提供的或文献介绍的校准模式。 应该对拟合曲线作检验和比较。 * 带现象（zone phenomenon）的影响 抗原或抗体过剩使免疫复合物部分或全部解离的现象，称为带现象。 免疫浊度测定中常表现