等离子体不同电数对神经干细胞分化.pptxVIP

等离子体不同电参数对神经干细胞分化的影响 彭海祥 生物科学1202 目录 课题来源、目的、意义 国内外研究状况及发展趋势 预计达到的目标、关键理论和技术、主要研究内容 完成课题的方案及课题研究进度安排 主要参考文献 课题来源、目的、意义 来源：近年来，等离子体医学成为国内外研究的热点，大气压常温等离子体在生物医学领域具有广阔的应用前景，研究表明，等离子体对生物体的作用主要是通过其产生的各类自由基、带电粒子、紫外线和激发态粒子等对生物体的综合作用来实现的。而等离子体中活性成分的组分及含量可以通过调节等离子体的放电参数和剂量来控制，因此等离子体可以有更广阔的应用前景。 目的：①通过改变电压、气流速度、气体成分等实验参数，确定最优的诱导神经干细胞分化的条件，选择较便捷的鉴定神经干细胞分化的实验方法②在各项电学参数中确定各项参数中对细胞作用的关键因素；③在各项神经干细胞生理环境的条件中确定对细胞影响的关键因素。 意义：神经干细胞的研究为多种神经系统疾病的治疗带来了希望，通过调控神经干细胞增殖和分化等，可以得到所需的不同类型的神经细胞，这样可为细胞移植的进行提供理想的供体细胞，被认为是神经退行性疾病及神经损伤性疾病最有前景的治疗策略之一。对神经干细胞增殖和分化的定向调控，有望探索出一条关于神经功能重建的干预调节方法，为等离子体在该领域深层次的研究开辟广阔思路和治疗途径。 国内外研究状况及发展趋势 等离子体被视为除固态、液态以及气态以外的物质的第四种形态，是由带电的粒子、激发态粒子、亚稳态粒子、离子、紫外线等组成的整体为电中性的导电流体，一般由气体放电产生。塞尔维亚贝尔格莱德大学的Miletić发现，等离子体可以促进人间充质干细胞的增殖和分化。更重要的是，等离子体中的重要活性粒子—一氧化氮（NO）是一种重要的神经递质，在神经系统的发育和信号传递中发挥重要作用。等离子体在生物医学上的应用主要体现在杀菌消毒、口腔医学、伤口处理、凝血、癌细胞处理、促进细胞增殖和分化等。 关键理论和技术 大气压常温等离子体中的活性成分 大气压常温等离子体中富含多种活性成分，如化学活性粒子（活性氧粒子和活性氮粒子）、带电粒子和各种离子（O-，N2+，N4+等） 紫外线（UV Radiation） 处于激发态和亚稳态的粒子， 电场等，它们可以与生物体相 互作用，对生物体产生不同的 生物学效果，使其生理学特性 发生改变。 免疫荧光技术 免疫荧光技术是根据抗原抗体反应的原理，将已知抗体或抗原标记上荧光素，再用这种抗体或抗原作为分子探针，通过荧光显微镜观察，检测细胞或组织内相应抗原（或抗体）的定位及表达情况。Nestin 是一种特异的神经干细胞标记蛋白，本研究用间接法对神经干细胞进行免疫荧光鉴定。神经干细胞可以分化为3种细胞谱系：神经元（β-Tubulin III）、星型胶质细胞（GFAP）和少突胶质细胞（O4）。 WST-1 法 WST（水溶性四唑盐）-1 法常用于检测细胞增殖和细胞毒性，具有快速、高灵敏、无毒等优点。其原理是：WST 可以被细胞线粒体内的脱氢酶还原为橙色的 Formazan，细胞增殖越快，颜色越深；细胞毒性越大，颜色越浅。 主要研究内容 1. 确定鉴定神经干细胞分化的实验方法； 2. 评估电学参数对诱导神经干细胞分化和增值的作用，并确定个参数中对细胞作用的关键因素； 3. 评估神经干细胞生理环境的条件中对细胞影响的关键因素。 完成课题的方案及课题研究进度安排 本课题预计3月20号开始实验 培养小鼠干细胞 （一周左右） 等离子处理 检测毒性确定适宜的参数（两周到三周） 根据增殖实验等离子体处理（两周到三周） 检测其分化 处理数据（一周以内） 主要参考文献 1. Xiong Zilan, Zhao Shasha, Mao Xiang, etc. Selective neuronal differentiation of neural stem cells induced by nanosecond microplasma agitation. Stem Cell Research. 2014,12(387–399). 2. Arnhold, S., Faßbender, A., Klinz, F.J., Kruttwig, K., Löhnig, B.,Andressen, C., Addicks, K., 2002. NOS-II is involved in early differentiation of murine cortical, retinal and ES cell-derived neurons—an immunocytochemical and functional approach. Int.J. Dev. Neurosci.