斑蝥临床应用及制研究.ppt

* 测定各种无机元素的含量，推测结合斑蝥素的存在形式 3 本研究证明，斑蝥含有结合状态的斑蝥素，但斑蝥素究竟是与何种元素结合而存在？ 2 1 斑蝥素是一种酸酐，能与体内的Na,Mg等元素结合，形成斑蝥素钠盐或镁盐等。 这些斑蝥酸的结合物在酸性环境中能够游离出斑蝥酸或者斑蝥素。 第七部分 斑蝥药材及饮片中无机元素比较研究 原子吸收法 * 分别取各批次样品粉末0.3g于消解罐中，精密称定，依次加入浓硝酸6ml，过氧化氢2ml，放入微波消解仪中，按微波消解程序表进行消解，待整个消解系统冷却后，取出消解罐，打开罐盖，用少量去离子水吹洗消解罐盖子和杯壁，在电炉上蒸发浓缩溶液至约1 mL，冷却，将溶液移入容量瓶中，用去离子水定容至50mL，作为测定铜(Cu)、锰(Mn)、铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)元素的供试品溶液。 另取上述母液5ml，移入50ml容量瓶中，用去离子水定容至刻度，作为测定锌(Zn)、铁(Fe)、镁(Mg)、钙(Ca)、钾(K)元素的供试品溶液。 随同试样做空白试验。 Step 功率(W) Ramp(min) Temp (℃) Hold(min) 1 800 5 120 1 2 800 3 150 3 3 800 4 180 25 ? 微波消解样品 * 分别采用火焰、石墨炉、氢化物发生-冷原子吸收法测定铜(Cu)、锰(Mn)、锌(Zn)、铁(Fe)、镁(Mg)、钙(Ca)、钾(K) ，铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)，汞(Hg) 。 ? 方法与结果 * ? 标准曲线的绘制 精密吸取各对照品溶液，按照仪器的操作条件，进行测定，进样量20μl，计算线性回归方程和相关系数。 * ? 含量测定 精密吸取各供试品溶液，按照仪器的操作条件，进行测定，进样量20μl，计算含量。 * 结果表明，各样品中均含有以上十一种微量元素，且其含量高低为：K＞Mg＞Fe＞Ca＞Zn＞Mn＞Cu＞Pb＞As＞Hg＞Cd。 在斑蝥各样品中， As、Hg、Pb的含量以头足翅最高，斑蝥药材、生斑蝥次之，米炒斑蝥最低； Cd、K、Zn的含量以生斑蝥最高，斑蝥药材、米炒斑蝥次之，头足翅最低； Cu、Mg的含量以米炒斑蝥最高，头足翅最低； Mn的含量以斑蝥药材最高，生斑蝥次之，米炒斑蝥和头足翅约等，最低； Fe的含量以斑蝥药材最高，米炒斑蝥最低； Ca的含量以头足翅最高，米炒斑蝥、斑蝥药材次之，生斑蝥最低。 * ? 结合斑蝥素结构的推断 根据各批次样品中结合斑蝥素的含量，将其百分含量换算成摩尔含量后，与它们体内Mg、Mn、Ca、Zn、Cu、K微量元素含量进行相关性研究。 结果提示斑蝥体内结合斑蝥素可能以斑蝥酸镁、斑蝥酸钾及少量斑蝥酸锌存在，但还待进一步研究。 * 斑蝥素和总斑蝥素含量：生斑蝥饮片〉斑蝥药材〉米炒斑蝥。斑蝥素的含量远远小于总斑蝥素的含量。斑蝥头足翅中斑蝥素和总斑蝥素含量较低，为非药用部位。 制定米炒斑蝥的SOP，为中药饮片厂执行GMP管理，提供了技术标准。 结 论 以HPLC法代替GC法，测定斑蝥素和总斑蝥素，控制斑蝥饮片及药材的质量。 * 结 论 建立斑蝥药材、生斑蝥及米炒斑蝥饮片质量标准草案，被2010版药典收载。 采用原子吸收法首次研究斑蝥中存在的结合斑蝥素，推测斑蝥体内结合斑蝥素可能以斑蝥酸镁、斑蝥酸钾及少量斑蝥酸锌存在，但还待进一步研究。 首次建立碱制斑蝥中斑蝥酸钠提取方法及HPLC法测定碱制斑蝥中斑蝥酸钠含量测定方法，稳定且重现性佳，可以较好的控制斑蝥碱制品的质量。 * 湖南中医药大学：蒋孟良教授陕西中医学院：李景丽、吴建华教授天津中医药大学：窦志英教授江西中医学院：龚千峰教授成都中医药大学：胡昌江教授 感 谢 提 供 样 品 支持 * 米炒斑蝥 南方大斑蝥 体型较大，头足翅偶有残留。色乌黑发亮，头部去除后的断面不整齐，边缘黑色，中心灰黄色。质脆易碎，有米炒后的焦香气。 黄黑小斑蝥 体型较小。 * ? 显微鉴别 刚毛 横纹肌纤维 复眼碎片 体壁碎片 气管壁碎片 主要特征 由于米炒斑蝥与生斑蝥、斑蝥药材均为动物