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呕必宁对顺铂所致脑组织5HT含量变化影响 　　(辽宁中医药大学，辽宁　沈阳110032) 　　摘要：目的：探讨中药复方呕必宁防治化疗药诱发呕吐的中枢机制。方法：应用行为学与分子生物学的方法，比较对照组、NS组、中药组实验动物静脉注射DDP前后，动物呕吐反应，血、脑脊液中DDP浓度，脑脊液、脑组织中的5－HT,5－HIAA含量变化。结果：注射DDP后与NS组比较，中药组猫的呕吐率下降；与此同时脑脊液中DDP浓度明显低于NS组、脑脊液及脑组织中5－HT和5-HIAA浓度较NS组显著降低。结论：呕必宁对DDP所致呕吐反应具有防治作用，其机制可能与降低猫脑脊液中DDP的浓度，降低脑脊液、脑组织中5－HT，5－HIAA含量有关。 　　关键词：呕宁；化疗吐；DDP；5－HT；5－HIAA 　　中图分类号：R－33　文献标识码：A　文章编号：1673－7717(2007)05－0869－03 　　 　　迄今的研究结果认为化疗药致呕吐机制主要为胃肠道及中枢两方面机制，关于中药复方防治化疗药所诱发呕吐的研究胃肠道机制已经报道，文章从神经中枢角度对中药复方防治化疗药诱发呕吐的可能机制进行了实验研究，报道如下。 　　 　　1、实验材料与方法 　　 　　1.1动物　健康杂种猫，体重为2.4～2.8kg，为12～18月龄，雄雌不限，均由辽宁中医药大学实验动物中心提供。1.2呕必宁组成　半夏15g，干姜15g，黄芩15g，竹茹15g，炙甘草10g，旋覆花(包煎)15g，人参15g，大枣15g等。由辽宁中医药大学附属医院药局提供，按常规方法煎煮后，浓缩成1g/mL浓度(相当于每毫升含生药1g)，置4℃冰箱保存备用。 　　1.3试剂及仪器　顺铂(DDP)由山东德州制药厂生产，批号：990305。正丁醇由上海油脂化工厂生产。5－HT、5－HAA标准品：均由中国医科大学生化检测中心提供。荧光剂：邻苯二甲醛，瑞士产。美国BIO－AND酶标仪。日本日立180－80型原子吸收分光光度计。 　　1.4动物分组　本实验共使用猫计30只，实验前进行适应性饲养1周后，按体重及试验的时间段随机分组：①对照组；②生理盐水组(NS组)；③呕必宁组(中药组)。每组10只，同步饲养。 　　1.5给药时间方法及标本制备　对照组不给与任何处置。Ns组及中药组每组给药量按人体一猫体表面积换算的等效剂量比率表换算如下：DDP 5mg/kg，中药5mL/kg。NS组于实验前2天经胃管灌服NS 5.0mL/kg体重；中药组灌服中药煎液5mL/kg体重，日2次分别于早晚8:00时进行，在灌服的5天后，即第10次灌服之后经股静脉缓慢注射DDP或NS(5mg/kg)。于注射后12h经股静脉采血和经枕骨大孔采脑脊液，用于测DDP、5－HT和5－HIAA。断头处死后立即采集延髓区脑组织1g，加5倍体积酸性正丁醇，置于4℃中进行研磨，制备匀浆，3000r/min离心5min后提取2mL上清液，采用文献方法测定脑组织中5－HT，5－HIAA的含量。血清及脑脊液中铂(Pt)的测定采用无火焰原子吸收分光光度法。 　　1.6呕吐发生频率观察　本观察在动物清醒状态下进行，参照WHO临床试验常见副反应中的呕吐分级标准，将24h内动物呕吐情况分为5级。0级：无呕吐动作发生；1级：出现1～2次呕吐动作；2级：出现3～5次呕吐动作；3级：出现5～10次呕吐动作；4级：出现10次以上呕吐动作。 　　1.7数据处理 本实验数据均用x±s表示，利用SPSS10.O统计软件进行分析，采用t检验及相关性检验进行统计学处理。 　　 　　2实验结果 　　 　　2.1 呕必宁对DDP所致猫呕吐频率的影响 如表1所示：与对照组比较，NS组注射DDP后0.5～3h内大多数动物开始出现频繁的呕吐反应，呕吐多为胃内容物。在DDP后1～8h期间呕吐反射最为明显，个别可持续到注射DDP后12h以后。中药组中也有4例动物出现呕吐反应，但均发生在注射DDP后1～3h左右，并且其表现比较轻，注射DDP 12h后呕吐反射动作不再发生。 　　2.2呕必宁对静注DDP后血清和脑脊液中DDP分布的影响如表2所示：在静注DDP后，NS及中药组动物血中DDP浓度在注射后12h，组间无显著性差异(P＞0.05)。脑脊液检测结果发现，脑脊液中的DDP浓度与同时间的血中DDP浓度比较，明显低于血中。而中药组脑脊液中DDP浓度始终低于NS组，差异十分显著(P＜0.01)。 　　2.3呕必宁对DDP所致脑脊液中5－HT 5－HIAA浓度变化的影响　静注NS和DDP后，NS组与中药组脑脊液中5－HT和5－HIAA浓度明显高于对照组(P＜0.01)。与NS组比较，中药组脑脊液中5－HT，5－HIAA的浓度虽然也升高，但是其升高的幅度明显低于N