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吸烟对慢性阻塞性肺疾病患者气道局部炎症影响 　　[摘要]目的 评价吸烟对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）患者急性加重期和稳定期气道局部炎症的影响。方法根据吸烟史将患者分为无吸烟史的对照组（A组）、无吸烟史COPD组（B组）、持续吸烟的COPD组（c组）和已戒烟的COPD组（D组）；分别在急性加重期和稳定期收集支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）；流式细胞术检测各组患者BALF中CD3+、CD4+、CDs+T淋巴细胞数，ELIsA法检测BALF中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α及干扰素（nterferon，IFN）-γ水平，并计算CD4+/CD8+T细胞比例。结果1.与非吸烟对照组比较，急性加重期和稳定期各组COPD患者BALF中CD4+细胞减少，而CD8+T细胞增加，因此CD4+/CD8+T细胞比例下降；同时TNF-α和IFN-γ水平均明显上升；2.在急性加重期，与非吸烟和已戒烟COPD患者比较，持续吸烟COPD患者BALF中CD4+T细胞下降，而CD8+T细胞比例上升，因而CD4+/CD8+T细胞比例下降，而TNF-α和IFN-γ水平显著升高；3.在稳定期，与非吸烟和已戒烟COPD患者比较，持续吸烟COPD患者BALF中CD4+和CD4+T细胞数无明显差异，但CD4+/CD8+比例稍下降，而TNF-α和IFN-γ水平显著升高。结论 持续吸烟的COPD患者在急性加重期和稳定期气道局部炎症存在差异，主要是CD8+T细胞的反应差异。 　　[关键词]吸烟；慢性阻塞性肺疾病；支气管肺泡灌洗液；T细胞；TNF-α；FN-γ 　　COPD是呼吸系统的常见病和多发病，临床主要表现为气流受限，肺功能呈进行性减退，导致咳嗽、咳痰、喘气、活动耐力下降，常常严重影响患者的劳动力和生活质量。吸烟被认为是COPD最重要的发病因素。国内外大量研究发现，COPD患者气道、肺实质、肺血管中均存在着慢性炎症，巨噬细胞、T细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞以及大量细胞因子，如TNFT-α及IFN-γ等均参与了慢性炎症过程，但它们各自在COPD发展过程中的确切功能目前尚未完全明了。本研究观察了吸烟COPD患者和非吸烟成人气道炎症的差异，以及急性加重期和稳定期持续吸烟COPD患者和和戒烟的COPD患者气道中炎症细胞及相关细胞因子的水平，探讨吸烟与急性加重期和稳定期气道炎症的相关性。 　　1、对象与方法 　　1.1 对象 所有入选对象均来自2006年1月至2009年12月入住我院呼吸科的住院患者，将其分为未吸烟对照组（A组）：17例，男13例，女4例，平均年龄66岁，该组患者临床表现为单纯咳嗽，经血液分析、痰液细胞学、胸部x线、肺功能检查均无异常发现，诊断考虑上气道咳嗽综合征。非吸烟的COPD组（B组）：2l例，男17例，女4例，平均年龄65岁。持续吸烟的COPD组（C组）：17例，男14例，女3例，平均年龄63岁。已戒烟的COPD组（D组）：19例，男16例，女3例，平均年龄66岁，戒烟10年以上。B、C、D三组诊断符合我国2007年制定的《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》的诊断标准，KFEVI30%预计值，并排除呼吸衰竭、肺源性心脏病、肺结核、肺癌、间质性肺疾病、糖尿病、冠心病、高血压、慢性肾衰竭以及糖皮质激素使用者。COPD患者入院时视为急性加重期，在治疗达临床缓解后4周视为稳定期，分别进行支气管肺泡灌洗采集标本。 　　1.2 方法 　　1.21 纤维支气管镜行支气管肺泡灌洗术：术前禁食禁水，口服可待因15mg镇咳，签署支气管镜知情同意书。利多卡因及丁卡因局部麻醉，咪达唑仑和芬太尼清醒镇静；所有患者选择右肺中叶为灌洗部位，用37℃灭菌生理盐水进行灌洗，每次20ml，总量60～100ml，2个呼吸周期后用50～100mmHg负压吸引回收灌洗液，回收率15%～30%；所得BALF进行预处理。 　　1.22 流式细胞术：将BALF过滤后，1000rpm离心，收集细胞和上清液，将细胞重悬于PBS中，分别用FITC标记记的抗CD3、抗CD4和抗CD8抗体（eBioscience），用流式细胞仪（EpicaAltra，Beckman，美国）计数BALF中CD34+、CD44+、CD84+T细胞。 　　1.23 ELISA：BALF离心后上清液保存在-20℃，分别用相应试剂盒（Invitrogen，美国）按说明书操作检测BALF中TNF-α及IFN-γ水平。 　　1.24 数据分析及统计：采用SPSSl 1.0版统计软件作统计学处理，实验数据均以均数±标准差表示，各组问显著性检验采用方差分析，两两比较用q检