GB/T 9695.16-1988肉与肉制品　四环素族抗生素残留量检验.pdf

中华人民共和国国家标准 UDC687.51;.52 肉与肉制品 四环素族 材8.06 GB 9695.16一as 抗生素残留量检验 Meatandmeatproducts-Methodfor theexaminationoftheresiduesoftetracyclines 1主皿内容与适用范围 本标准规定了肉和肉制品中四环素族抗生素残留量的检验方法。 本标准适用于肉和肉制品中四环紊族抗生素残留量的检验。 2 引用标准 GB9695.19 肉与肉制品 取样方法 3 原理 四环素族 (四环素、土霉素、金霉素)抗生素具有很强的抑菌作用。在接有特定微生物的平板培 养基上放人牛津杯，在牛津杯内加满试样溶液，培养后测最抑菌圈的大小。 试剂与培养基 4.1 试剂: 4.1.1磷酸盐缓冲液 (pH4.5)精确称取碑酸二氢钾 (GB 1274，分析纯)13.68,溶解于蒸馏水中， 定容到l000mL,高压灭菌115C,30min，冷却后置4℃冰箱内保存。 4.1.2生理盐水称取氮化钠 (GB 1266)8.59溶解于1000mL蒸馏水中，高压灭菌1150C,30min, 4.1.8 盐酸 (GB622):O.Imol/L溶液。 4.1.4标准四环素原液:精确称取四环素50mg，用。.lmol/L盐酸1mL溶解，用水定容到1000mL，在 4℃冰箱中可保存一周。 4.2培养基: 4.2.1菌种培养基: 胰蛋白陈 l0.Og 牛肉膏 5.0g 抓化钠 (GB 1266) 2.5g 琼脂 14.0一16.0g 燕馏水 l000mL 将以上成分加热溶解，高压灭菌1210C15min，最终pH6.510.1, 4.2.2检定用培养基: 胰蛋白陈 6.0g 牛肉膏 1.59 酵母膏 3.0g 琼脂 14.0-16.0g 中华人民共和国商业部19.一02一25批准 1989一03一01实施 Gs 9695，i6一 I7 蒸馏水 1000mL 将以上成分加热溶解，高压灭菌121`C15min,最终pH5.8士。.1, 5 仪器和设备 5.1培养皿:内径90mm，底部平整光滑，具陶质盖。 5.2 牛津杯:内径61O.Imm，外径7.810.1-m,高度1010.1mm. 5.3 游标卡尺:测量抑菌圈直径用。 与.4 均质器。 石.6 离，L.、机。 5.‘恒温水浴。 5.了恒温培养箱。 5二 电热于烤箱17010.10C, 6 试样 6.1 按GB9695.19取样。 6.2 至少取有代表性试样200g，用绞肉机绞2次混匀，放在封闭容器中于冰箱内贮存备用，试样要 尽快分析。 7 分析步骤 7.1检样液的制备 称取试样10.0g，加入。.Imol/L磷酸缓冲液20mL小心搅匀放置60min,然后于均质器中均质((3000 一6000r/min)1min,经4OOOr/min离心IOmin，其上清液为检样液。 7.2 菌液和检定用平板的制备 7.2.1菌液的制备 菌种:蜡样芽抱杆菌 (BaccereusATCC11778)由卫生部药品生物制品检定所提供。 将菌种移种于盛有300mL菌种培养基的克氏瓶中，于30℃培养箱中培养7天。镜检芽抱数达到85/0o 以上，用生理盐水25mL洗下菌谷，置65C恒温水浴中加热30min，离心((2000r/min)20min，弃去上 清液，如此重复洗涤芽抱悬液三次。再置于650C恒温水浴加热30min，然后取生理盐水50mL制成芽抱悬 液。置4℃冰箱中可保存一个月。 7.