GB/T 17812-1999饲料中维生素E的测定　高效液相色谱法.pdf

GB/l 前 言 饲料中维生素E的测定目前尚无国际标准，本标准是参照瑞士罗氏药品化学有限公司维生素研究 部发表的饲《料中维生素、类胡萝 卜— 现代分析方法》中“用高效液相色谱法测定配合饲料、预混合饲 料和浓缩维生素中的dl-a一生育酚”而制定的。在技术内容上参照该法，在编写格式上依据 GB/T1.1-1993标《准化工作导则 第1单元:标准的起草与表述规则 第1部分:标准编写的基本规 定》和GB/T1.4-1988标《准化工作导则 化学分析方法标准编写规定》。 为了使饲料中维生素E测定方法科学、准确、经济、实用，适合于我国不同实验室大量饲料样品的 测定，在参照国外分析方法的基础上增加了反相色谱测定条件。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。 本标准主要起草人:陈必芳、赵小阳、李俊玲。 中华人民共和国国家标准 饲料中维生素E的测定 高效液相色谱法 GB/t17812 1999 DeterminationofvitaminEinfeeds High-pressureliquidchromatography 1 范围 本标准规定了饲料中维生素E的测定一一高效液相色谱法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料、维生素预混料中维生素E的测定。检测范围为每 千克样品中含维生素E的量在1.IIU(dl-a一生育酚1mg)以上 2 弓!用标准 厂列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文 本标准出版时所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准必威体育精装版版本的可能性。 GB/T6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 用碱溶液皂化试验样品，去除脂肪，使试样中天然生育酚释放出来并水解，添加的生育酚乙酸Lib为 游离的生育酚。乙醚提取未皂化的物质，蒸发乙醚，用正己烷溶解残渣。提取物注入高效液相色Ai柱.用 紫外检测器在280nm处测定，外标法计算维生素E(dl-a一生育酚)含量 4 试剂和材料 除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，色谱用水为去离子水，符合GB/T6682 中用水规定 4.1 无水乙醚:无过氧化物。 4.1.1 过氧化物检查方法:用5mL乙醚加1mL100o碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游 离碘，水层呈黄色，或加0.500淀粉指示液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。 4.1.2 去除过氧化物的方法:乙醚用5%硫代硫酸钠溶液振摇，静置，分取乙醚层，再用蒸馏水振摇，洗 涤两次，重蒸，弃去首尾5%部分，收集馏出的乙醚，再检查过氧化物，应符合规定。 4.2 乙醇 4.3 正11,烷:重蒸馏(或光谱纯)。 4.4 1,-I-二氧六环。 4.5 甲醇:优级纯。 4.6 2,6一二叔丁基对甲酚(BHT) 4.7 无水硫酸钠 4.8 氢氧化钾溶液:500g/I。 国家质量技术监督局1999一08一10批准 2000一02-01实施 GB/r17812-1999 419 抗坏血酸乙醉溶液5川L;取。.5g抗坏血酸结晶纯品溶解于4ml温热的蒸馏水中用乙醇稀释 至100nli，临用前配制 4.10 维生*E(dl-a生,y酚)标准溶液 4.10.1dl-a一生育酚标准贮备液:准确称取dl-a一生育酚纯品油剂CUSP)100.0mg于100ml棕色容敏 瓶中，用正己烷溶解并稀释至刻度，混匀，4C保存，该贮备液浓度每毫升含维生素El.0mg 4.10.2dl-,一生育酚标准L作液 准确吸取dl-a一生育酚贮备液((4.10.1)用正己烷(4.3)按1;2。比例 稀释。若用反相色谱测定，将 1.00nil,dl-a生育酚标准贮备液代八 10ml棕色小容址瓶中.用氮气吹 干.用甲醇(4.5)稀释至刻度、混匀 再按比例稀释。配制上作液浓度为每皂升含维生素E50pg 4.11酚酞指示剂乙醇济液:10g/l。 4_12 氮气(纯度99.9i;,)。 5