GB/T 17817-1999饲料中维生素A的测定　高效液相色谱法.pdf

GB/e17817-1999 前 言 饲料中维生素A的测定目前尚无国际标准，本标准是在参照瑞士罗氏药品化学有限公司维生素研 究部发表的饲《料中维生素和类胡萝 卜素— 现代分析方法))’用高效液相色谱法测定配合饲料、预混合 饲料和浓缩维生素中维生素A”而制定的。在技术内容上参照该法，在编写格式上依据GB/丁1.1 1993《标准化工作导则 第1单元:标准的起草与表述规则 第1部分:标准编写的基本规定》和 GB/T1.4--1988标《准化工作导则 化学分析方法标准编写规定》。 为了使饲料中维生素A测定方法科学、准确、经济、实用，适合于我国不同实验室大量饲料样品的 测定，在参照国外分析方法的基础上增加了反相色谱测定条件。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。 本标准主要起草人:陈必芳、赵小阳、李俊玲。 中华人 民共和 国国家标准 饲料中维生素A的测定 高效液相色谱法 GB/T17817-1999 DeterminationofvitaminA infeeds- High-pressureliquidchromatography 1 范围 本标准规定了饲料中维生素A的测定— 高效液相色谱法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料和维生素预混料中维生素A的测定。测量范围为每 千克样品中含维生素A在1OOOIU以上。 2 引用标准 F列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效 所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准必威体育精装版版本的可能性。 GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 用碱溶液皂化试验样品，乙醚提取未皂化的化合物，燕发乙醚并将残渣落解于正己烷中，将正己烷 提取物注入用硅胶填充的高效液相色谱柱，用紫外检测器测定，外标法计算维生素A含量。 4 试荆和材料 除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，色谱用水为去离子水，符合GB/T6682 中用水规定。 4门 无水乙醚(无过氧化物)。 4门 1过氧化物检查方法:用5mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游 离碘，水层呈黄色。若加。.5%淀粉指示液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。 4.1.2 去除过氧化物的方法:乙醚用5%硫代硫酸钠溶液振摇，静置，分取乙醚层，再用蒸馏水振摇洗 涤两次，重蒸，弃去首尾5%部分，收集馏出的乙醚，再检查过氧化物，应符合规定。 4.2 乙醇。 4.3 正己烷:重蒸馏(或光谱纯)。 4.4 异丙醇:重燕馏。 4.5 甲醇 :优级纯 4.6 2.6一二叔丁基对甲酚(BHT) 4.7 无水硫酸钠。 4.8氢氧化钾溶液500g/I。 国家质2技术监督局1999一08一10批准 2000一02-01实施 Gs/T17817-1999 4.9 抗坏血酸乙醇溶液5g/I_:取0.5g抗坏血酸结晶纯品溶解于4mL温热的蒸馏水中，用乙醇稀释 至100ml，临用前配制。 4.10 维生素A标准溶液 4.10门 维生素A标准贮备液:准确称取维生素A乙酸酷油剂(每克含1.00X106IU)0.1000g或结晶 纯品。.0344g(符合中国药典)于皂化瓶中，按分析步骤(7-1)皂化和提取，将乙醚提取液全部浓缩蒸发 至干，用正己烷溶解残渣置入100mL棕色容量瓶中并稀释至刻度，混匀，4C保存。该贮备液浓度为每 毫升含1ooolu维生素A, 4.10.2 维生素A标准工作液:准确吸取1.00mL维生素A标准贮备液((4.10.1)，用正己烷(4.3)稀 释10。倍;若用反相色谱测定，将1.00mL维生素A标准贮备液置人10ml棕色小容量瓶中，用氮气吹 干，用甲醇(4.5)溶解并稀释至刻度，混匀，再按 1:10比例稀释。该标准工作液浓度为每毫升含lOIU 维生素Aa 4.11酚酞指示剂乙醇溶液10g/Lo 4.12 氮气99.9 。 5 仪器、设备 5 1 实验