基因工程的技术操作(陶正).doc

基因工程操作技术（调整） 1. 为什么要学习基因工程技术操作？ 只有在实验室才能真正学会和掌握基因工程的重要概念和相关原理。 只有在实验室才能真正增长知识和才干。 只有亲手做过的实验才能记忆犹新。 2. 珍惜实验课的体会： 1)基因工程实验的开设来之不易。 2)实验课上的学习内容将为你今后的科学生涯打下宝贵的基础。 3. 实验室常见的仪器设备及用途： 1)纯水仪：用途：制纯水 注意事项：防止爆炸，防止发水。 2)天平：托盘天平（配平实用） 电子天平（0.01、0.001、0.0001） 3)磁力搅拌器（具有加热功能） 4）酸度计 用途：配置药品 调PH值 注意事项：防止腐蚀 保护电极 4)高压灭菌锅（手动、半自动、全自动） 用途：灭菌。 注意事项：使用前检查锅内水是否充足 使用前设定好灭菌的温度、压力和时间 打开和关闭灭菌锅是注意同时旋转对称的螺旋 至少待灭菌无稍微冷却后方可去除 5)超低温冰箱（--80。C） 7）普通冰箱（--20。C） 用途：用于贮藏药品、材料等。 注意事项：确保冰箱门关严 防止冻伤 6)超净工作台： 用途：用于植物组织培养、微生物接种。 注意事项：⑴确保使用状态时紫外灯必须关闭 ⑵保持清洁 ⑶不要用酒精擦拭有机玻璃挡板 7)恒温培养箱： 用途：用于液体培养基中对细菌的培养 注意事项：使用前调好温度计转速 8)高速冷冻离心机（台式、立式） 用途：用于DNA、RNA等提取过程中的高速冷冻离心 注意事项：⑴使用前要预冷，调好温度转速等 ⑵必须调平 ⑶使用后要关电源，擦拭干净（离心机内部的水珠） 9)PCR仪： 用途：用于基因扩增 注意事项：⑴使用前设好程序 ⑵使用后关闭电源 10)移液器：（0.2—1000μl） 用途：用于微量液体的移取 注意事项：⑴使用前必须看清楚量程，并在量程范围内使用。 ⑵使用时要缓慢用力 ⑶切记避免有机溶剂腐蚀枪杆 ⑷使用后调至最大量程 11)微波炉： 用途：融化琼脂糖凝胶，或琼脂粉 注意事项：⑴注意微波时间 ⑵避免污染物污染 12)凝胶电泳装置： 用途：用于核的电泳的检测 注意事项：⑴使用前要注意电泳的方向与电泳槽的正负极是否吻合，设定拟使用的电压，电流等。 ⑵使用时要戴PE手套，并注意不要产生大量的污染物。 13)UV投射仪及凝胶成像系统： 用途：用于核算条带的观察及照相 注意事项：⑴不要造成EB污染 ⑵使用时要先开电源，再开紫外，关闭是相反。 ⑶使用后将凝胶几时拿走放回收处，并使仪器内部保持清洁。 14)烘箱： 用途：用于烘干器皿 注意事项：⑴防止器皿水分过多，造成短路。 ⑵塑料凳器皿切记不要高温烘烤 ⑶玻璃器皿等高温烘烤后，注意及时断电，千万不能过夜。 15)分子杂交炉： 用途：用于Southern、Northern等分子杂交。 注意事项：⑴正确设定杂交温度，时间等。 ⑵防止同位素遗漏，污染。 16)恒温培养箱、培养室： 用途：生物材料的培养 注意事项：⑴正确设定培养温度、湿度、光照时间等培养条件。 ⑵防止培养箱，培养是污染。 ⑶注意温度的调节。 17)制冰机： 用途：制碎冰。 注意事项：⑴使用时先接通水源。 ⑵使用后要关闭水源。 18)蛋白质、核算分析仪： 用途：测定核算及菌液的浓度。 注意事项：⑴使用时要先预热。 ⑵使用前要调零。 ⑶要调好光源。 19)测序仪： 用途：对核算进行测序。 注意事项：防止污染、按程序操作。 20)基因枪： 用途：用于转基因。 注意事项：无菌操作，保持清洁。 使用时检查是否漏气。 21)其他：恒温水浴锅、研钵研杵、液氮罐、电炉子、通风橱、涡旋器、同位素室及暗室。 4. 常见的有害化学物质： 苯酚、氯仿、异戊醇。 溴化乙锭（EB）。 十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）。 焦乙酸二乙脂（DEPC）. 放射