GB/T 17816-1999饲料中总抗坏血酸的测定 邻苯二胺荧光法.pdf

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  • 2018-09-10 发布于四川
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  •   |  1999-08-10 颁布
  •   |  2000-02-01 实施

GB/T 17816-1999饲料中总抗坏血酸的测定 邻苯二胺荧光法.pdf

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BGr/ 17816--1999 前 言 本标准参考了美国公职分析化学家协会AOAC(1995年版))45.1.14-45.1.16维《生素制品和果汁 中的维生素C》、维《生素制品中的维生素C》和 食《品中的总维生素C》的规定,在技术内容上,综合上述 三种方法,在操作步骤上作了相应的变更,以便于实际操作。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准由国家饲料质量监督检验中心(武汉)负责起草。 本标准主要起草人;屈利文、钱肪。 中华人民共和国国家标准 饲料中总抗坏血酸的测定 邻苯二胺荧光法 GB/T17816-1999 Determinationoftotalascorbicacidinfeeds- o-Phenylenediaminefluorometry 1 范围 本标准规定了用邻苯二胺荧光法测定饲料中总抗坏血酸的方法。 本标准适用于单一饲料、配合饲料、预混料及浓缩饲料。不适用以酷化抗坏血酸形式添加的各种饲 料中抗坏血酸的测定。 在最终提取液中抗坏血酸最小检出限为。.022pg/mL. 2 q1用标准 下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均 为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准必威体育精装版版本的可能性。 GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 先将试样中抗坏血酸在弱酸性条件下提取出来,提取液中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗 坏血酸,与邻苯二胺(OPDA)反应生成有荧光的哇呢琳(quinoxaline),其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓 度在一定条件下成正比。另外,根据脱氢抗坏血酸与硼酸可形成硼酸一脱氢抗坏血酸络合物而不与邻苯 二胺反应,以此作为“空白”排除试样中荧光杂质的干扰。 4 试剂 本标准所用试剂,除特殊说明外,均为分析纯。 实验室用水应符合GB/丁6682中三级水的规格。 4门 偏磷酸一乙酸溶液:称取15g偏磷酸,加入40mL冰乙酸及250mL水,加温,搅拌,使之逐渐溶解, 冷却后加水至500mL。于4C冰箱可保存7-10天。 4.2 0.15mol/L硫酸溶液:取10mL硫酸,小心加入水中,再加水稀释至1200mL. 4.3偏磷酸一乙酸一硫酸溶液:以0.15mol/L硫酸溶液((4-2)为稀释液代替水,其余同4.1配制 4.4 50%乙酸钠溶液:称取500g乙酸钠(CH,COONa·3H,O),加水至1000mL. 4.5硼酸一乙酸钠溶液:称取3g硼酸,溶于100mL乙酸钠溶液(4-4)中。临用前配制。 4.6邻苯二胺溶液:称取20mg邻苯二胺,于临用前用水稀释至looMI 4.7抗坏血酸标准溶液(1mg/mL):准确称取50mg杭坏血酸,用溶液(4.1)溶于50mI容量瓶中,并 稀释至刻度。临用前配制。 4.8 抗坏血酸标准工作溶液(100pg/mL):取10mL抗坏血酸标准溶液((4.7),用溶液((4.1)稀释至 国家质f技术监督局1999一08一10批准 2000一02一01实施 Gs/T 17816-1999 100ml 稀释前测试pH值,如其pH大于2.2时,则应用溶液((4-3)稀释。 4.90.04%百里酚蓝指示剂溶液:称取。.1g百里酚蓝,加。.02mol/1氢氧化钠溶液,在玻璃研钵中 研磨至溶解,氢氧化钠的用量为10.75mL,磨溶后用水稀释至250mL 变色范围:pH值等于1.2为红色;pH值等于2.8为黄色;pH值大于4.。为蓝色。 4.10 活性炭的活化:加200g炭粉于1L盐酸((1+9)中,加热回流1--2h,过滤 用水洗至无铁离子 (Fe)为止,者于110^-120C烘箱中干燥,备用。 检验铁离子方法:利用普鲁士蓝反应。将2%亚铁氰化钾与〕%盐酸等量混合,将上述洗出滤液滴 入,如有铁离子则产生蓝色沉淀。 5 仪器、设备 5 1 荧光分光光度计:激发波长350nm,发射波长430nm,lcm石英比色皿。 2 5 实验室用样品粉碎机。 5

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