GB/T 13266-1991水质　物质对蚤类(大型蚤)急性毒性测定方法.pdf

中华人民共和国国家标准 水质 物质对蚤类(大型蚤) GB/T 13266一91 急性毒性测定方法 Waterquality-Determinationoftheacutetoxicity ofsubstancetoDaphnia(Daphniamagnastraus) 本标准参照采用国际标准ISO6341-1982水《质— 大璧蚤运动抑制的测定》。 本标准用大型蚤D〔aphniamagnastraus(CladoceraCrustacea)〕为试验生物。测定物质或废水的半 数抑制浓度，半数致死浓度(24h-EC50,24h-LC5。或48h-EC50,48h-LC50)，用于判断物质或废 水的毒性程度。 1 适用范围 本标准适用于以下范围: a.在试验条件下可溶的化学物质(包括工业原料和产品、食品添加剂、农药、医药等)。 b，工业废水。 c 生活污水。 d 地表水、地下水。 2 原理 2.1 24h-EC50,48h-EC50 指在24或48h内百分之五十的受试蚤运动受抑制时被测物的浓度。 2.2运动受抑制(Immobilization) 反复转动试验容器,15s之内失去活动能力的大型蚤，被认为运动受抑制。即使其触角仍能活动，也 应算做不活动的个体。 2.3 24卜LC50,40h-LC50 指在24或48h内百分之五十的受试蚤死亡时被测物的浓度，以受试蚤心脏停止跳动为其死亡标 志。 3 试验材料 3，试验生物为大型蚤 (〔Daphniamagnastraus)(甲壳纲，枝角亚目)〕。 保持良好的培养条件，使大型蚤的繁殖被约束在孤雌生殖的状态下(见附录A), 选用实验室条件下培养3代以上的、出生6^-24h的幼蚤为试验蚤。试验蚤应是同一母体的后代。 3.2 试验用水: 3.2.1配制人工稀释水为试验用水。新配制的标准稀释水pH为7.8士。2,硬度250士25mg/L(以 CaCO。计)Ca/Mg比例接近4:1,溶解氧浓度在空气饱和值的80%以上，并不含有任何对大型蚤有毒 的物质。 人工稀释水用电导率10p5/cm(1mS/m)以下的蒸馏水或去离子水(以下简称水)按下述方法配 蘸而而瘫1991-Q9下4I蔺 - 1992一Q$一Q1实施 GB/T 13266一91 制。 氯化钙溶液 将11.76g氯化钙(CaC,t·2H20)溶于水中稀释至1L, b.硫酸镁溶液 将4.93g硫酸镁(MgSO,·7H20)溶于水中稀释至11。 碳酸氢钠溶液 将2.59g碳酸氢钠(NaHC03)溶于水中稀释至1L, d. 氯化钾溶液 将0.25g氯化钾(KCl)溶于水中稀释至1L. 各取以上四种溶液25mL混合，稀释至1L.必要时可用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节pH值，使 其稳定在7.8士。.2。标准稀释水应容许大型蚤在其中生存至少48h，并尽可能检查稀释水中不含有任 何已知的对大型蚤有毒的物质。例如:氯、重金属、农药、氨或多氯联苯。 3.2.2 如果所进行的试验需要使用其他稀释水或改变稀释水的pH，应在试验报告中注明所用稀释水 的性质。要求稀释水的硬度在150^-300mg/L(以CaCO3计)范围内，Ca/Mg比例接近4e1,pH不得低 于6.5或不得高于8.5，同一试验pH波动不得大于。.5. 3.3 重铬酸钾(K2Cr30,)，分析纯。 4 试验液的制备 4.1试验物质溶液的配制 4.1.1试验物质可以是可溶于水的固体、液体或气体，但要求组分一定，具有代表性、重复性。 4.1.2 易溶于水的试验物质可直接加到稀释水里，也可以溶解在蒸馏水或去离子水中配成贮备液加人 到稀释水中配成试验液，每升稀释水中的贮备液要少于10m1。贮备液应当低温保存。 4.1.3难溶于水的物质，可用适当的方法，将其溶解和分散。包括使用超声波装置及其他低毒溶剂增 溶。如果使用溶剂，溶剂在试验液中的浓度不应超过