GB/T 17811-1999动物蛋白质饲料消化率的测定　胃蛋白酶法.pdf

GB/T 17811-1999 前 言 本标准等效采用美国公职分析化学家协会(AOAC)(1995年版)((动物蛋白质饲料的胃蛋白酶消化 率测定方法 过滤法》。 在技术内容上，原方法中所用的“恒温搅动器”，根据实际情况改用恒“温平转摇床”;再则，限于国内 试剂条件，选用市场上易购的胃蛋白酶试剂(1:3000)代替原方法指定的胃蛋白酶试剂(1:10000)o 本标准由中华人民共和国国内贸易部提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准由国家饲料质量监督检验中心(武汉)负责起草。 本标准主要起草人:屈利文、钱防。 中华人民共和国国家标准 动物蛋白质饲料消化率的测定 胃 蛋 白 酶 法 GB/r17811--1999 Determinationofdigestibilityinanimal proteinfeeds-Pepsinmethod 1 范围 本标准规定了动物蛋白质饲料消化率的胃蛋白酶测定方法 本标准适用于所有动物性蛋白质饲料，不适用于植物性蛋白质或混合饲料消化率的胃蛋白酶测定 方法。 2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准必威体育精装版版本的可能性。 GB/T6432-1994饲料中粗蛋白测定方法 GB/T6433-1994饲料粗脂肪测定方法 GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 脱过脂的试样，用温热的胃蛋白酶溶液，在恒温、持续不断地搅拌下消化16h，过滤分离不溶性残 渣，洗涤、干燥，测定残渣的粗蛋白含量。同时，测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白含量。 4 试剂 本标准所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯 实验室用水应符合GB/T6682中三级水的规格 4门 0.20胃蛋白酶溶液:将6.1mL浓盐酸稀释至1000mL水中(溶液pHl-2)，加热至42^-45C, 加入2g活性为1:10000生化级胃蛋白酶若〔活性不是1e10000，可使用活性1:3000生化级胃蛋 白酶〕‘(不可使用非生化级胃蛋白酶)，应注意胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶浓度应为每毫升201UD，并缓慢 搅拌直至溶解 勿在加热板上加热胃蛋白酶溶液或配制时过热。临用前配制。 4.2 乙醚 4.3 丙酮。 4.4 定氮试剂:按GB/T6432中试剂及配制方法规定。 采用说明: 1)Ac)AC中指定为t:10000 国家质ti技术监督局1999一08一10批准 2000一02一01实施 GB/r17811-1999 5 仪器、设备 5 1 恒温式平转摇床，〕:温控范围20^-50C，水浴式或空气浴式均可，转速可调(15^300r/min). 2 5 实验室用样品粉碎机 5 3 索氏抽提器、脱脂设备:按GB/T6433中仪器、设备规定。 定氮仪器、设备:按GB/T6432中仪器、设备规定。 ;.;实验室常用仪器、设备。 6 试样制备 取具有代表性试样，用四分法缩分至200g，然后粉碎至全部过。.90mm孔筛(2。目)，混匀装于密 封容器，保存备用。 7 测定步骤 7.1 脱脂 称取1-2g试样用乙醚(4.2)脱脂(含脂肪小于1%可不脱脂，含脂肪10010%建议脱脂，含脂肪 大于10%则必须脱脂)。脱脂方法可参照GB/T6433中粗脂肪抽提方法进行。脱脂后的样品需烘干。 了.2 胃蛋白酶消化 称取脱脂烘干((7.1)后的样品若干克(精确至。.0002g，含氮量约5-80mg)于250ml带盖磨口 瓶中，加150ml新配制的并已预热至42.45℃的胃蛋白酶溶液((4-1)，要确保样品完全被胃蛋自酶溶 液浸湿，盖紧瓶盖，将瓶夹于恒温摇床((5.1)上，于45℃恒定搅动16h进行保温消化。 7.3 消化残渣的处理 从搅动器上取下磨口瓶，呈450角放置，让残渣沉淀15min以上，随后在铺有快速滤纸的布氏漏斗