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- | 1999-11-10 颁布
- | 2000-04-01 实施
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GB/r17999.8-1999
前 言
用血清平板凝集试验监测鸡白痢沙门氏菌感染,结果难以判定时,可用试管凝集试验(TA)进行复
检,为此本标准规定了SPF鸡试管凝集试验。
SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准,包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检
测方法.本标准为 S《PF鸡 试管凝集试验》。
SPF鸡微生物学检测方法还包括以下部分:
GB/T17999.1-1999SPF鸡 红细胞凝集抑制试验;
GB/T17999.2-1999SPF鸡 血清中和试验;
GB/T17999.3-1999SPF鸡 血清平板凝集试验;
GB/T17999.4-1999SPF鸡 琼脂扩散试验;
GB/T17999.5-1999SPF鸡 酶联免疫吸附试验;
GB/T17999.6--1999SPF鸡 胚敏感试验;
GB/T17999.7-1999SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验;
GB/T17999.9-1999SPF鸡 间接免疫荧光试验。
本标准由中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出
本标准由农业部畜牧兽医司归口。
本标准起草单位:中国兽药监察所、农业部实验动物中心。
本标准主要起草人:张学琴、陈德威、赵立红。
中华人民共和 国国家标准
Gs/T 17999.8一 1999
SPF鸡 试管凝集试验
SPFchicken-Tubeagglutinationtest
1 范围
本标准规定了试管凝集试验所用试剂、材料,操作程序及结果判定等。
本标准适用于SPF鸡感染鸡白痢沙门氏菌或鸡伤寒沙门氏菌后的抗体监测。
2 原理
同血清平板凝集试验,亦是细菌性抗原与相应的抗体结合后 在适量电解质参与下,经过一段时间
出现肉眼可见的凝集现象,只是结果判定以凝集价表示
3 试剂和材料
3.1抗原:试管凝集试验用鸡白痢一鸡伤寒抗原(含菌10亿/mL)
32 阳性、阴性血清。
13 被检血清口
3.4 o.5Y,石炭酸生理盐水:
了,炭酸 59;
a化钠 8.59;
蒸馏水 1000mL;
混合溶化,6.897Pa 20min消毒备用
15 常规血清学试验用品。
4 操作程序
4.1每份被检血清需要5支小试管(口径8mm-10mm)。第1管加石炭酸生理盐水1.8mL,其余管
各加Iml。
4.2第1管加被检血清。.2mL,与石炭酸生理盐水混匀(使成1:10稀释)。取1mL移至第2管,混匀
后连续倍比稀释至第4管,最后从第4管内吸出1mL弃去。如此各管血清最后稀释依次为I:20,
1:40,1,80,1:160,1:320
4.3 各管加入抗原液1mL
4.4 振荡混匀后 置37C感作24h,观察结果。
4.5 梅次试验须设三种对照各一份。
4.5.1 抗原对照:在试管中加抗原液1mL,再加。.5%石炭酸生理盐水1mLo
4.5.2 阳性血清对照 阳性血清稀释至原来效价,每管加入抗原液1mL
4.5.3 阴性血清对照:操作方法同被检血清。
4.5.4 全部试管振荡后,置37`C24h后移入4C-8C冰箱过夜,使结果更易判定
4.6 结果观察
国家质量技术监督局1999一11-10批准 2000一04一O1实施
GB/T 17999.8-1999
4.6.1从40C-8℃冰箱取出试管架,暂不振动试管。
4.6.2 轻轻取出每支试管,先观察试管内上清液和管底凝集物,再轻振管底,使凝块从管底升起,最后
按液体清浊、凝块大小记录。
4.6.3 观察结果时应首先观察抗原对照与阴性血清对照,均应呈 “一,’(即不凝集),阳性血清对照呈不
同程度凝集,表明试验可靠。
4.6.4 凝集结果判定见表to
表 1 试管凝集结果判定
类 别 试 管 所 见 结 果
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