GB/T 16287-1996食品中淀粉的测定方法　酶-比色法.pdf

GB/T16287-1996 前 言 食品中淀粉测定方法，一般采用化学方法— 酸水解法。由于酸水解淀粉时，样品中的其他糖类被 分解为还原糖(单搪)，造成淀粉的测定结果偏高。本标准采用酶一比色法是在检索了近20年74篇国外 文献的基础上，经过反复实验、验证而制定的。要使食品中的淀粉含量测定准确，必须使淀粉完全溶解。 本标准吸取了法国Cuher.J.C1982年总结的有效溶解方法，即二甲基亚矾法，达到了使淀粉完全溶解 的目的。 淀粉酶解后的产物— 葡萄糖的测定方法，与GB/T16285-1996保持一致。 本标准的附录A是标准的附录。 本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位:中国农垦北方食品监测中心。 本标准经全国食品工业标准化技术委员会秘书处审核。 本标准主要起草人:张宗城、刘宁 、郝煌。 中华人民共和 国国家标准 食 品 中淀粉 的测定方法 Ga/T 16287一1996 酶 一 比 色 法 Fordeterminationofstarchinfood Enzyme-colorimetricmethod 1 范围 本标准规定了用酶一比色法测定食品中淀粉的方法。 本标准适用于各类食品中淀粉的测定。 本标准最低检出限量为0.09fag(淀粉)/mL(试液)。 2 原理 淀粉在淀粉葡萄糖昔酶(AGS)催化下，最终水解为葡萄糖。葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下，催 化}-D-葡萄糖(葡萄搪水溶液)氧化，生成D-葡萄糖酸-S一内醋和过氧化氢。受过氧化物酶(POD)催化，过 氧化氢与4-氨基安替比林和苯酚生成红色酿亚胺。在505nm波长处测酿亚胺的吸光度，计算食品中淀 粉的含量。 ((Cc6sHH,Io。O0,5)).。++nnHHZzOo-A-G-SnC,Hu06 Cc6。H1-1,，2:0066++0022三}理乳二6。HH,，o。Oa,+H20Z H,0z+C6HsOH+CH,3N60坚坦C6H5NO+HzO 3 试荆 I1组合试剂盒 1号瓶:内含淀粉葡萄糖昔酶(amyloglucosidase)200U(活力单位)、柠檬酸、柠橄酸三钠; 2号瓶:内含0.2mol/L磷酸盐缓冲液 ((pH=7.0)200mL，其中含4-氨基安替比林为 0.00154mol/L; 3号瓶:内含0.022mol/L苯酚溶液200mL; 4号瓶:内含葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)800U(活力单位)、过氧化物酶(辣根，peroxidase) 2000U(活力单位)。 1,2,3,4号瓶须在4℃左右保存。 3.2 酶试剂溶液 3.2.1将1号瓶中的物质用重蒸馏水溶解，使其体积为 “mL.轻轻摇动(勿剧烈摇动)，使酶完全溶 解。此溶液即为淀粉葡萄糖普酶试剂溶液.其中柠徽酸(缓冲溶液)浓度为0.1mol/L,pH=4.6。在4C 左右保存，有效期1个月。 3.2.2 将2号瓶与3号瓶中的溶液充分混合。 3.2.3 将4号瓶中的酶溶解在3.2.2混合液中，轻轻摇动(勿剧烈摇动)，使酶完全溶解，即葡萄糖氧化 国家技术监奋局1996一04一10批准 1996门2一01实施 GB/T 16287-1996 酶一过氧化物酶试剂溶液。在4C左右保存，有效期 1个月。 3.3 二甲基亚矾(分析纯)。 3.4 6mol/I盐酸溶液 将 2mol/I盐酸((GB622，分析纯)与等体积重蒸馏水混合，摇匀。 3.5 6mol/I氢氧化钠溶液 称取24g氢氧化钠(GB629，分析纯)，溶于1000ml重蒸馏水中，摇匀。 I6 淀粉标准溶液 称取经10。士2C‘干燥2h的可溶性淀粉(HGB-3095，分析纯)0.2000g,溶于少量60℃重蒸馏水 中，冷却后定容至100m1_,摇匀。将此溶液用重蒸馏水稀释Vlo.oo-Ioo,即200pg/mL淀粉标准溶液。 4 仪器