基因组编辑的技术.pdf

16/4/18 •  Nature杂志介绍了2014年值得关注的技术,包括 CRISPR和基因组编辑 基因组编辑技术 •  ZFN Gene editing •  TALEN tools •  Case9 RNA-guided endonuclease •  2011 Nature年度技术：人工核酸酶介导的基因组 编辑（genome editing with engineered nucleases）技术 基因组编辑技术：又称为基因组定点修饰技术，原则 •  锌指核酸酶（ZFN）：zinc finger nuclease，又 上能在任何物种基因组的任何位置上进行定点切除，从而能 名锌指蛋白核酸酶，是一种人工改造的核酸内切 在内源性序列上产生突变。 酶，由一个 DNA 识别域和一个非特异性核酸内切 酶构成，其中DNA识别域赋予特异性，在DNA特定 锌指核酸酶 （ZFN） 位点结合，而非特异性核酸内切酶赋予剪切功能， 两者结合就可在DNA特定位点进行定点断裂。 归巢核酸内切酶 （engineered meganucleases） •  归巢核酸内切酶（engineered meganuclease）: 人工核酸酶 转录激活因子样效应物核酸酶 又称大范围核酸酶”，是一种切割得非常罕见的 （transcription activator-like effector 核酸内切酶。它们可以识别的DNA序列要比“经 ucleases，TALENs） 典”限制酶可以识别的大得多，所以它们在人类 基因组中产生解离的频率低。这使得它们有可能 单链RNA介导的CRISPR-Cas9 用于基因疗法，作为具有高度针对性的分子刀来 瞄准特定的基因。 FokI •  是一种存在于细菌Flavobacterium •  转录激活子样效应因子核酸酶(TALEN)：TALEs首