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- | 1999-08-10 颁布
- | 2000-02-01 实施
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GB/r17818-1999
前 言
饲料中维生素D 的测定目前尚无国家标准和国际标准,本标准是参照美国公职分析化学家协会
AOAC(1995年版)混《合饲料、预混合物和宠物食品中维生素D3液相色谱法》及瑞士罗氏药品化学有
限公司维生素研究部发表的饲《料中维生素和类胡萝 卜素— 一现代分析方法尸用高效液相色谱法测定
配合饲料和预混合饲料中维生素D3”而制定的。在技术内容上参照两法,在编写格式上依据
GB/T1.1-1993标《准化工作导则 第1单元:标准的起草与表述规则 第1部分:标准编写的基本规
定》和GB/T1.4-1988标《准化工作导则 化学分析方法标准编写规定》。
为了使饲料中维生素D3测定方法科学、准确、经济、实用,适合于我国不同实验室大量饲料样品的
测定,在参照国外分析方法的基础上,增加了反相色谱测定条件。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。
本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。
本标准主要起草人:陈必芳、赵小阳。
中华人 民共和 国国家标准
饲料中维生素D3的测定
高效液相色谱法 GB/T 17818-1999
DeterminationofvitaminD3infeeds-
High-pressureliquidchromatography
1 范围
本标准规定了饲料中维生素D3的测定一一高效液相色谱法
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料和维生素预混料中维生素D3的测定 测量范围为每
千克样品中含维生素D3(胆钙化醉)的量在5001U以上。
2 引用标准
下列标准所包含的条文.通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均
为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准必威体育精装版版本的可能性。
GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法
3 方法原理
用碱溶液皂化试验样品,乙醚提取未皂化的化合物,蒸发乙醚,残渣溶解于甲醇并将部分溶液注入
高效液相色谱净化柱中除去干扰物,收集含维生素D,淋洗液馏分,蒸发至干,溶解于正己烷中,注入高
效液相色谱分析柱,用紫外检测器在264nm处测定,通过外标法计算维生素D。的含量
当样品中维生素D。标示量超过每千克10000IU时,可省去高效液相色谱净化柱,试验溶液直接
注入色谱分析柱分析。
4 试剂和材料
除特殊注明外,本标准所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水,色谱用水为去离子水,符合GB/T6682
用水的规定。
4,无水乙醚:无过氧化物。
4.1.1过氧化物检查方法 用5mi乙醚加1MI.10%碘化钾溶液,振摇Imin,如有过氧化物则放出游
离碘,水层呈黄色。若加。.500淀粉指示液,水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。
4.1.2 去除过氧化物的方法:乙醚用5%硫代硫酸钠溶液振摇,静置,分取乙醚层,再用蒸馏水振摇洗
涤两次,重蒸,弃去首尾5%部分,收集馏出的乙醚,再检查过氧化物,应符合规定
4.2 乙醇
4.3 正己烷:重蒸馏(或光谱纯)。
4.4 1,4一二氧六环。
4.5 甲醉:优级纯。
一 一 一 ,,,,,,,,,,,一 ‘
国家质量技术监督局,999一08一10批准 2000一02一01实施
GB/T17818-1999
4.6 2,6- 叔i一基对甲酚(BHT)
4.7 无水硫酸钠
4.8 氢氧化钾溶液500g/1
4.9抗坏血酸乙醇溶液5g/1:取。.5g抗坏血酸结晶纯品溶解于4m工温热的蒸馏水中.用乙醇稀释
至100mL,临用前配制。
4.10 氯化钠溶液100g/Lo
4.11 维生素D,标准济液
4.11门 维生素D:标准贮备液:准确称取50.0mg维生素D,(胆钙化醇)USP结晶纯品,于50mL棕
色容童瓶中,用正己烷溶解并稀释至刻度,4℃保存。该贮备液的浓度为每毫升含1mg维生素D,.
4.11.2 维生素D:标准工作液:准确吸取维生素D。标准贮备液((4.11.1),用正己烷按1:100比例稀
释,该标准溶液浓度为每
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