大孔吸附树脂富集纯化大黄总蒽醌工艺研究.docVIP

大孔吸附树脂富集纯化大黄总蒽醌工艺研究 　　摘要：目的：筛选纯化大黄总蒽醌的最佳树脂，确定树脂纯化大黄总蒽醌的工艺参敬。方法：以大黄中总蒽醌含量为指标，研究大孔吸附树脂富集、纯化大黄总蒽醌的吸附性能和洗脱参数。结果：x－5型树脂对大黄总蒽醌有良好的吸附性能。洗脱剂为60％乙醇，用量为6倍量树脂柱体积，大黄总蒽醌富集于60％乙醇洗脱液部分，且除杂质效果好。结论：通过x 5型大孔吸附树脂富集、纯化后，大黄总蒽醌的洗脱率在90％以上，总蒽醌的含量提高到35.4％。说明采用本法富集、纯化大黄总蒽醌是可行的。 　　关键词：大孔吸附树脂；大黄总蒽醌；纯化工艺 　　中国分类号：R284.2 　　文献标识码：A　文章编号：1673－7717(2008)01－0115－02 　　 　　大孔吸附树脂是一类新型非离子型高分子化合物，应用于抗生素的提取分离等领域已近20年。近年来广泛应用于中草药化学成分的富集与纯化。根据其孔径、表面积、树脂结构、极性差异等分为多种类型，根据分离要求加以选择。大黄Radix et Rhizoma Rhei来源于蓼科植物，性寒味苦，是临床上常用中药之一。大黄的化学成分较复杂。其主要成分为蒽醌类衍生物，在前期实验中采用正交实验法优选出大黄总蒽醌的最佳提取工艺。本实验通过对不同型号大孔吸附树脂吸附性能进行筛选，确定了大黄采用x－5树脂，工艺稳定，质量可控，为大黄中药复方制剂的工艺研究提供了依据。 　　 　　1　材料 　　 　　zF－l三用紫外分析仪(上海精科实业有限公司)；x－5，AB－8。NKA－9树脂(南开大学化工厂，医药级)；大黄素对照品(中国药品生物制品检定所，批号：0756―200110)；大黄提取液(自制)；所用试剂均为分析纯。 　　 　　2　大孔吸附树脂型号的选择 　　 　　2.1　静态吸附行为考察取处理后的x 5树脂20mL置250mL量瓶中，取大黄醇提液一定体积。测定大黄总蒽醌含量。水浴挥散至无醇味，加入量瓶中，加水定容，振摇，放置24h，测定上清液中总蒽醌量，二者之差即为树脂的吸附量。同法处理AB－8、NKA－9树脂，测定结果见表1。 　　由此可见，x－5树脂对大黄总蒽醌吸附较好。其静态吸附总蒽醌4.4mg／mL树脂。 　　 　　2.2　动态吸附行为考察准确量取预处理好的大孔吸附树脂x 5、AB－8、NKA－9各20mL，装人树脂柱中，乙醇冲洗至加水无混浊现象。再用蒸馏水冲洗至无醇味。吸取已知大黄总蒽醌含量的溶液，水浴挥散至无醇味，加水适量，通过3种不同型号树脂柱，进行动态吸附。待吸附均匀一致时，停止上样，记录上样体积，计算总蒽醌上样量x。用蒸馏水冲洗树脂柱，收集所有冲洗液，定容，测定大黄总蒽醌冲洗量Y。计算大黄总蒽醌吸附量(即x―Y)。将吸附的成分用95％乙醇洗脱至洗脱液近无色，定容，测定大黄总蒽醌解吸量。计算解吸率。结果见表2。 　　 　　 　　结果表明：x－5树脂对大黄有较好的吸附及解吸附作用。其动态吸附大黄总蒽醌约为4.25mr／mL树脂，故选择该附树脂作为大黄的最佳吸附树脂。 　　 　　3　工艺研究 　　 　　3.1　pH=3酸性条件下树脂对大黄总蒽醌的吸附准确量取预处理好的x 5大孔吸附树脂20mL，装入树脂柱中，处理同前。定量吸取已知含量的大黄总蒽醌溶液水浴挥散至无醇味，加水适量，调节pH=3，于树脂柱中进行动态吸附。结果见表3。 　　 　　结果表明：树脂在pH=3条件下对大黄总蒽醌的吸附－量没有明显增加，故选择x－5树脂对大黄中蒽醌类成分提取时不调pH值。 　　 　　3.2　加入低浓度氯化钠条件下树脂对大黄总蒽醌的吸附行为　本实验考察加入不同浓度氯化钠对吸附作用的影响。结果表明溶液中加入3％氯化钠其吸附量比正常参比溶液的吸附量有所增加，且其值与调整pH时的吸附量相当，考虑到氯化钠价廉，对人体无害，又不被大孔吸附树脂吸附，故只采用3％氯化钠来增加吸附量。 　　 　　3.3　上样浓度的确定将不同浓度的大黄药材溶液分别通过已处理过的x－5大孔吸附树脂，考察不同生药浓度下的吸附行为。结果表明：不同上样浓度对树脂吸附量的影响不大，故选择醇提取后挥散至无醇味，适量加水后直接上样。 　　 　　3.4　泄漏曲线的考察按上述所确定的吸附条件，进行动态吸附，分段收集流出液。每份10mL，共收集20份。测定大黄总蒽醌含量，并以总蒽醌量为考察指标，绘制泄漏曲线。结果见图1。 　　 　　 　　由测定结果及泄漏曲线可知，从第7份大黄总蒽醌开始明显泄漏，故确定大黄样品液最大上柱体积为70mL(即相当于树脂的3.5倍体积)。 　　 　　3.5　洗脱剂的确定按上述所确定的吸附条件，用4根x－5树脂柱吸附大黄总蒽醌。先用水洗脱至洗脱液近无色，再分别用