慢病毒颗粒制备及应用0524.ppt

Outline 体细胞定向重编程的研究思路 慢病毒的构建原理 慢病毒颗粒制备方法及应用 Application of lentivirus in somatic reprogramming Vierbuchen T, et al.(2010) Direct conversion of fibroblasts to functional neurons by defined factors. Nature 463:1035-1041 Lijian H, et al. (2011) Induction of functional hepatocyte-like cells from mouse fibroblasts by defined factors. Nature 475:386-389 Edward E. M, et al. (2011) Highly Efficient miRNA-Mediated Reprogramming of Mouse and Human Somatic Cells to Pluripotency. Cell stem cell 8:376-388 Protocol of Directed Reprogramming Profile Detection---qPCR Array Profile Detection---miRNA qPCR Array miRNA qPCR Validated Primers 人、小鼠、大鼠miRNA的Q-PCR引物都通过严格的实验验证 /product/search/index.php?prt=22 输入miRNA name、Acc No或Sequence等即可获得验证结果 Expression of reprogramming factors -------ORF expression clone Expression of reprogramming factors -------miRNA clone Pre-made lenti-vector expression clone Gene Groups/Families Reserch of reprogramming mechanism Reserch of reprogramming mechanism Virus vector HIV Viron HIV replication Packaging mix ----------four plasmids system Mammalian Constitutive promoters Packaging system Lenti particle Packaging Packaging Transfection 48 hours Titration of the Lentiviruses Titration of the Lentivirus in 24-well plates Titration of the Lentiviruses Purification and Concentration of Lentiviruses Purification and Concentration of Lentiviruses (Cont.) Application of Lentiviruses Products and Services offered by GeneCopoeiaTM * 本作品采用知识共享署名-非商业性使用 2.5 中国大陆许可协议进行许可。 专业交流 模板超市 设计服务 NordriDesign中国专业PowerPoint媒体设计与开发 本作品的提供是以适用知识共享组织的公共许可（ 简称“CCPL” 或 “许可”） 条款为前提的。本作品受著作权法以及其他相关法律的保护。对本作品的使用不得超越本许可授权的范围。 如您行使本许可授予的使用本作品的权利，就表明您接受并同意遵守本许可的条款。在您接受这些条款和规定的前提下，许可人授予您本许可所包括的权利。 查看全部… GeneCopoeiaTM 4006 020 200 唐珍洁 zhenjietang@ GeneCopoeia Inc. 日本Riken： 2004年1月-4月，为Riken提供1600个人类基因克隆构建。 Roche： 2006年4月-2007年3月，合作完成13000个人类基因克隆的无细胞体系蛋白表达。 NCBI ： 2009年成为NCBI推荐克隆供应商。 中国科学院广州生物医药与健