心血管系疾病动物模型探讨.pdf

宝枫林 心血系系疾病的动物模型 （一）动脉粥样硬代模型 常选用兔、猪、大鼠、鸡、鸽、猴和犬等动物。常用的复制方法有下面几种（包括高血 脂模型）： 1 ．高胆固醇、高脂肪饲料喂养法：是目前比较常用的方法，特点是死亡率低，可长期 观察，但费时久。一般在家兔、鸽、鸡等，经数周喂养就可产生明显的高脂血症，经数月就 能形成早期的动脉粥样硬化病变。大白鼠、小白鼠及犬则较难形成，如果饲料中增加蛋黄、 胆酸和猪油等，可用促进作用。为了促进病变的形成，在高脂饲料中还可加入甲基硫氧嘧啶、 丙基硫氧嘧啶、甲亢平、苯丙胺、维生素D、烟碱或蔗糖等。 具体复制方法：兔诱发模型：体重2kg 左右，每天喂服胆固醇0.3g，4 个月后肉眼可见 主动脉粥样硬化斑块；若每天剂量增至 0.5g，3 个月后可出现斑块；若增至每天 1g，可缩 为2 个月。在饲料中加入15%蛋黄粉、0.5%胆固醇和5%猪油，经3 周后，将饲料中胆固醇减 去，再喂3 周，可使主动脉斑块发生率达100%，血清胆固醇可长高至2000mg%。大白鼠诱 发模型：喂服 1 ～4%胆固醇、10%猪油、0.2% 甲基硫氧嘧啶、86 ～89%基础饲料，7 ～10 天； 或喂服10%蛋白黄粉、5%猪油、0.5%胆盐、85%基础饲料，7 天后均可形成高胆固醇血症。小 白鼠诱发模型：雄性小白鼠饲以1%胆固醇及10%猪油的高脂饲料，7 天后血清胆固醇即升为 343±15mg ；若在饲料中再加入0.3%的胆酸，连饲7 天，血清胆固醇可高达 530±36mg%。 鸡、鸽诱发模型：4 ～8 周的莱克享鸡，在饲料中加入1 ～2%胆固醇或15%的蛋黄粉，再加5 ～ 10%的猪油，经过6 ～10 周，血胆固醇升至1000 ～4000mg% ，胸主动脉斑块发生率达100%。 鸽喂饲胆固醇3g/kg/天，加甲基硫氧嘧啶0.1g，可以产生较多动物斑块。 2 ．免疫学方法：将大白鼠主动脉匀浆给兔注射，可引起血胆固醇、β-脂蛋白及甘油三 脂升高。给兔注射马血清 10ml/kg/次，共4 次，每次间隔 17 天，动脉内膜损伤率为88%， 冠状动脉亦有粥样硬化的病变；同时给予高胆固醇饲料，病变更加明显。兔喂饲含 1%胆固 醇的饮料，静脉注射牛血清白蛋白250mg/kg，可加速高胆固醇饲料引起的动脉内膜病变形 成。 3 ．注射儿茶酚胺类药物法：给兔静脉滴注去甲肾上腺素1mg/ 日，时间为30 分钟。一 种方法是先点滴 15 分钟，休息5 分钟后再滴 15 分钟；另一方法是每次点滴5 分钟和休息 宝枫林 5 分钟，反复6 次。以上两种方法持续两周，均可引起主动脉病变，呈现血管壁中层弹性纤 维拉长、劈裂或断裂，病变中出现坏死及钙化。 4 ．注入同型半胱氨酸法：给兔皮下注射同型半胱氨酸硫代内脂（dl-homocysteine thiolactone）20 ～25mg/kg/ 日（以5%葡萄糖溶液配成1mg/ml 的浓度），连续20 ～25 天， 成年兔及幼兔均可出现动脉粥样硬化的典型病变。冠状动脉管腔变窄、动脉壁内膜肌细胞增 生、纤维组织增生、弹力纤维断裂、管壁变厚、基质中出现成堆的颗粒状和纤维状异染物质。 如在饲料中加入20%的胆固醇，再同时注射同型半胱氨酸硫代内脂，则全部动物出现显著的 动脉粥样硬化病变。 5 ．注射表面活化剂法：给大白鼠腹腔注射Triton WR1339 300mg/kg ，9 小时后使血清 胆固醇升高 3 －4 ；20 小时后雄性大白鼠血清胆固醇仍为正常的 3 ～4 倍，而雌性大白鼠却 为6 倍左右；用药后24 小时左右升脂作用达最高点，48 小时左右恢复正常。其中以甘油三 脂升高最强，其次是磷脂、游离脂肪酸及游离胆固醇，对胆固醇脂没有影响。 6 ．胆固醇一脂肪乳剂静脉注射法：将胆固醇及猪油各3g 在电磁加热搅拌下完全溶解 后加入吐温-803g ，搅匀，再缓缓加入丙二醇 5ml 和沸水的混合液，充分搅拌乳化，使成 100ml，经抽滤后显微镜下检查，乳剂颗粒均匀，并小于7 ～8μm 即可应用。给兔耳缘静脉 注射5ml/kg,可见血浆胆固醇及甘油三酯立即升高。总胆固醇升高至正常的6 倍，其中主要 是游离胆固醇，游离胆固醇和总胆固醇的比值为90%。以后血浆总胆固醇逐渐降低，6 小时 时出现一低峰，后略有回升。3 ～4 天后游离胆固醇和总胆固醇的比值接近正