岛津lc-20a型液相色谱系统的使用跟维护.pdf

中国药科大学 生命科学与技术学院 岛津LC-20A 型液相色谱系统的使用和维护 一、 系统配置 系统组成：本系统由 2 个 LC-20AT 溶剂输送泵分为 A,B 泵、手动进样器、 C18 填料色谱柱、SPD-20A 紫外－可见检测器、N2010 工作站等组成。 二、 准备工作 流动相准备：使用前应待检样品的检验方法准备所需的流动相（水使用纯净 水，其他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于 20mmol/L ）用合适 的 0.45μm 滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，有机相用尼龙， 水相用纤维素），超声脱气 20min 以上待用。 1、色谱柱准备：根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应 与流动相流向一致（检查柱上“FLOW ”流向） 2 、样品溶液配置：配置样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适 0.45μm 的样品过滤器过滤后待用。如检测 中发现检测峰拖尾严重，可 稀释后使用。严禁使用未经处理的浑浊溶液进样。 3、检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 三、 开机、参数设定及平衡系统 1、 接通电源，依次开启稳压电源、A 泵、B 泵、检测器，待泵和检测器自检结 束后，打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。 2 、 排气泡或更换流动相的操作方法（操作时虑头必须全部浸入流动相中，否则， 可能带入气泡。更换流动相时，须先把泵关掉，等柱压为零再拿出虑头更换。） 2.1. 将 A/B 管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中； o， 2.2. 逆时针转动A/B泵的排液阀 180 ，打开排液阀； 2.3. 按 A/B 泵的[purge]键，pump 指示灯亮，泵大约以 9.9ml/min 的流速 冲洗，3min （可设定）后自动停止； 2.4. 将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。 1 中国药科大学 生命科学与技术学院 2.5. 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。 2.6. 如按以上方法不能排尽气泡，从柱人口处拆下连接管，放入废液瓶 中设流速为 5 ml/min，按pump 键停泵，重新接上柱并将流速重设定 为规定值。 3、参数设定 3.1、波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所 需波长值，按[Enter]键确认。按 [CE]键退出到初始屏幕。 3.2、流速设定：在A 泵显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需 流速（柱在线时流速一般不超过 1ml/min），按[Enter]键确认。按 [CE] 键退出。 3.3、流动相比例设定：在 A 泵显示初始屏幕时，按[conc] 键，用数字键 输入流动相 B 的浓度百分数，按[Enter]键确认。按 [CE]键退出。 3.4、梯度设定 3.4.1. 在 A 泵显示初始屏幕时，按[edit]键，[Enter]键； 3.4.2. 用数字键输入时间，[Enter]键，重复按[func]键选择所需功能（FLOW 设 定流速，BCNC 设定流动相 B 的浓度），按[Enter]键，用数字键输入设定 值，按[Enter]键， 3.4.3 重复上一步设定其他时间步骤； 3.4.4 用数字键输入停止时间，重复按[func]键直至拼命显示 STOP，按[Enter] 键确认。按 [CE]键退出。 4、平衡系统 4.1. 按《N2010