用实时荧光PCR方法鉴定转基因玉米T14T25.pdf

遗 　传 HEREDITA S ( Beijing) 26 (5) :689～694 ,2004 研究报告 用实时荧光 P CR 方法鉴定转基因玉米 T14/ T25 1 ,2 3 4 1 曹际娟 ,覃 　文 ,朱水芳 ,曹远银 ( 1 沈阳农业大学植物保护学院 ,沈阳 110 16 1 ;2 辽宁出入境检验检疫局 ,大连 11600 1 ; 3 广州出入境检验检疫局 ,广州 5 10623 ;4 国家质检总局动植物检疫实验所 ,北京 100029) 摘 　要 : 以实时荧光 PCR 技术鉴定商业化种植的转基因玉米 T14/ T25 品系 。根据转基因玉米 T14/ T25 转入的外 源基因质粒图谱 ,设计转基因引物和探针进行 PCR 和实时荧光 PCR 检测 ,建立了转基因玉米品系鉴定的实时荧光 PCR 方法 。实验结果表明 ,用 Taq Man 探针可检测到 T14/ T25 产生的荧光信号 ,而对其他玉米品系则检测不到荧 光信号 ,为转基因产品的鉴定检测提供了新方法 。 关键词 :实时荧光 PCR ; T14/ T25 转基因玉米 ; 鉴定 中图分类号 :Q943 　　　文献标识码 :A 　　　 文章编号 :0253 - 9772 (2004) 05 - 0689 - 06 I d e n t if i c a t i o n f o r Ge n e t i c a ll y M o dif i e d Ma i z e T14/ T25 w i t h R e a l Ti m e Fl u o r e n s c e n t P CR Me t h o d CAO J iJ uan1 ,2 ,Q IN wen3 ,ZHU ShuiFang4 ,CAO YuanYin1 ( 1 Shenyang Agriculture Univer sity Plant Prot ection College , Shenyang 110 16 1 , China ; 2 Liaoning EntryExit Insp ection and Quarantine Bure au , Dalian 11600 1 , China ; 3 Guangzhou EntryExit Insp ection and Quarantine Bure au , Guangzhou 5 10623 , China ; 4 Institut e of Animal and Plant Quarantine , AQ SIQ , Beijing 100029 , China) A b s t r a c t :To identify genetically modified ( GM) maize T14/ T25 line s ,a realtime fluore scent PCR (RTF PCR) a ssay wa s p erformed in this study. Primer s and Taq man probe s sp ecific for inserted gene s in the T14/ T25 were used to conduct the re altime fluorenscent (RTF) PCR and PCR a ssays. The RTF PCR method wa s e stablished to detect and identify GM maize