【毕业论文】B23通过抑制Eg5ATP酶活性抑制Eg5对微管的解聚.doc

中国科学技术大学 硕士学位论文 B23通过抑制Eg5 ATP酶活性抑制Eg5对微管的解聚 B23通过抑制Eg5 ATP酶活性抑制Eg5对微管的解聚 作者姓名： 作者姓名： 学科专业： 细胞生物学 导师姓名： 教授 完成时间： 二○一○年五月八日  University of Science and Technology of China A dissertation for master’s degree B23 inhibits Eg5-mediated microtubules depolymerization B23 inhibits Eg5-mediated microtubules depolymerization via inactivating its ATPase activity Author’s Name Author’s Name： speciality： Cellular Biology Supervisor： Prof. Finished time: May 8th,  B23通过抑制Eg5 ATP酶活性抑制Eg5对微管的解聚 八系 中国科学技术 大学 Abstract II 摘 要 核仁磷酸蛋白B23是肿瘤细胞核仁中含量丰富的磷酸蛋白质，对细胞增殖和生长起着多重重要的调控作用。由于基因剪切方式不同产生两种蛋白质亚型，亚型1，即通常情况下所说的B23，全长有294个氨基酸，比亚型2的C端多35个氨基酸。B23的C端DNA和RNA结合结构域（DRBD）易发生突变，其突变能够诱发急性髓性白血病AML。AML的发生是因为B23的突变体引起了B23在细胞质中的异常大规模聚集。虽然B23在细胞核内的功能被广泛研究并报道，但是B23在细胞质行使何种功能还没有具体报道。因此，B23突变体诱导AML的具体机制目前仍不清楚。有鉴于此，我们试图了解B23在细胞中存在的意义。 首先，我们在试图研究B23在细胞质可能存在的新功能时，我们采用酵母双杂交系统筛选并鉴定了一个B23的新的结合分子，Kinesin家族成员Eg5，并进一步证实了B23与Eg5的相互作用发生在细胞质中。这对我们探索B23在细胞质的功能提供了线索。 其次，我们在对B23与Eg5结合的意义进行研究时，我们惊喜地发现B23能够调控微管聚集状态，并且这种调控作用与Eg5对微管的调控是截然相反的：Eg5能够促进微管解聚；而B23则保护微管防止微管解聚。这进一步对了解B23在细胞质的功能提供机会。 再次，我们在研究B23调控微管的作用机制时，我们发现B23通过直接抑制Eg5的Motor活性，即ATPase酶活，实现了调控微管的功能。这完整地提供了一个B23在细胞质中的新功能以及行使功能的机制，为我们进一步了解B23提供新的平台。同时，由于Eg5是细胞内最重要的肿瘤治疗靶点，所以，对B23尤其是其C端DRBD结构域的进一步研究，可为药物开发提供潜在的靶点，从而提供新的肿瘤治疗方案。 总而言之，我们的工作为了解B23在正常肿瘤细胞的细胞质中存在的意义和其在细胞质在的功能做出了自己的发现。 关键词：核仁磷酸蛋白B23，Eg5，肿瘤治疗，微管动力学， ABSTRACT Nucleophosmin/B23, an abundant nucleolar protein, plays multiple roles in cell growth and proliferation. There are two B23 isoforms. Subtype 1, which is the full length of B23, is 35 amino acids longer than Subtype 2. HYPERLINK /wiki/C-terminus \t _blank C-terminus of B23 ,which is called DNA and RNA Binding Domain （DRBD）, is tend to mutanted., and its mutations could induce HYPERLINK /wiki/Acute_myeloid_leukemia \t _blank Acute myeloid leukemia (AML). It is reported that B23 mutations lead to aberrant localization of the B23 protein into the cytoplasm and promote AML occurrence. Despite its functions inside