《食品安全国家标准 食品中三甲胺的测定》编制说明.pdf

  食品安全国家标准《食品中三甲胺的测定》 编制说明 一、标准起草的基本情况 1、任务来源：国家卫生和计划生育委员会（原卫生部） 2、项目编号：spaq-2012-61 标准名称：食品中三甲胺的测定 3、标准起草单位：国家食品安全风险评估中心，湖北省疾病预防控制中心 4、主要起草人：蒋定国，杨大进，闻胜，周妍，刘潇，毛燕妮，罗苹，陈明 简要起草过程：根据《2012 年卫生标准制（修）订项目委托协议书》要求，标准起草 小组自 2012 年 7 月起，依据标准制定程序和要求，查阅国内外的文献资料，对方法的技术 参数进行了研制，按标准化工作导则编写标准检验方法和编制说明，并对本方法进行了验证， 发放了检验方法征求意见稿，通过广泛征求意见，增强标准的科学性和可操作性。按照协议 要求，于 2013 年12 月底完成国家标准送审稿，按期提交。 二、与我国有关法律法规和其他标准的关系 氧化三甲胺广泛分布于猪肉、鱼和虾等动物性食品中，在微生物和酶的作用下会降解 生成三甲胺和二甲胺。我国在GB 2730-2005腌腊肉卫生标准中规定了三甲胺氮的25mg/kg限 量值，相当于三甲胺105.5 mg/kg。为了解决准确测定三甲胺的含量问题，需要建立更为灵 敏和准确的色谱检测方法，同时扩大检测食品范围，此次建立的检测方法是作为卫生标准的 配套检测方法。 三、标准的重要内容及主要修改情况 （一）方法条件的选择 1、提取方法的选择 为了更准确地检测，需要先用提取溶液把三甲胺提取出来，再与标准溶液一样进行顶空 方法检测。由于三甲胺在酸性条件下可以形成铵盐，易溶于水溶液，同时动物性食品含有大 量脂肪、蛋白质，而三氯乙酸有利于沉淀蛋白质，因此通过实验研究，最终选择 5%三氯乙 酸水溶液作为提取溶剂。在顶空处理时，加入碱液将铵盐转化为挥发性的胺，使三甲胺在气 液两相达到动态平衡，而其他酸类物质留在溶液中，进入气相色谱柱的干扰就少。 对于提取方式的选择，研究表明均质机匀浆提取，每次提取 1分钟就可以使提取溶液较 好地进入组织内部，迅速提取目标物，提取效率高，因此选择均质机匀浆提取方式。 2、仪器条件的选择 （1）色谱柱的选择 1      GC-FID的色谱柱：比较了HP-5 30m（长）×0.32mm（内径）×0.5µm（膜厚）（含5% 二苯基）、DB-WAXetr 30m（长）×0.32mm（内径）×0.5µm（膜厚）（聚乙二醇）、FFAP 30m （长）×0.32mm（内径）×0.5µm（膜厚）（含改性聚乙二醇）3种色谱柱的分离效果，实验 结果表明：DB-WAXetr和FFAP 色谱柱都能较好地将实验样品中脂类、其他胺类等干扰物与三 甲胺完全分开，其中DB-WAXetr分离效果最好，因此选择DB-WAXetr作为GC-FID的色谱柱。 GC-MS的色谱柱：根据GC-FID的色谱柱实验结果，本方法测试了与DB-WAXetr固定相相 同的质谱柱HP-INNOWAX 30m（长）×0.25mm（内径）×0.25µm（膜厚），结果表明HP-INNOWAX 柱的分离效果满足分析要求。 （2）升温程序的选择 因三甲胺沸点比较低（3℃左右），DB-WAXetr色谱柱最低使用温度为40℃左右，因此 初始温度选择了40℃，保持3min，三甲胺已出峰，然后以30℃/min速率升至220℃，保持1min， 样品中各成分均已出峰，在色谱柱中无残留，因此升温程序最高温度选择为220℃。同理， GC-MS的HP-INNOWAX柱升温程序也选择为：40℃保持3min，以30℃/min速率升至220℃，保持 1min。 （3）质谱条件的选择 三甲胺分子量为59，属于小分子，根据其性质和文献调研，选择EI源作为离子源，离子 源温度对三甲胺的响应值影响不大，选择220℃为离子源温度，选择响应值较高的m/z 58、 m/z 59和m/z 42三个离子作为定性离子，以丰度最高的m/z 58为定量离子。 3、顶空条件的选择 （1）氢氧化钠的加入量：因加入氢氧化钠固体溶解比较慢，而