单增李斯特氏菌及其检测方法.doc

单增李斯特氏菌及其检测方法 单增李斯特氏菌 单增李斯特氏菌，学名Listeria monocytogenes，一种革兰氏阳性菌，是李斯特菌属。李斯特菌属(Listeria)共分为2个群， 7个种：第一群包括单核细胞增生性李斯特菌(L monocytogenes，LM)(亦称产单核细胞李斯特菌)、伊氏李斯特菌(L ivanovii)(亦称绵羊李斯特菌)、英诺克李斯特菌(L innocua)(亦称无害李斯特菌)、韦氏李斯特菌(L welshimei)、塞氏李斯特菌(L seeligeri)，第二群包括格氏李斯特菌(L grayi)和莫氏李斯特菌(L mulTayi)。其中，单增李斯特菌是唯一能引起疾病的人畜共患病的 HYPERLINK /view/562382.htm \t _blank 病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病，感染后主要表现为 HYPERLINK /view/33826.htm \t _blank 败血症、 HYPERLINK /view/117577.htm \t _blank 脑膜炎和单核细胞增多。 单增李斯特氏菌检测方法 细菌培养法 该菌营养要求不高，兼性厌氧，最适在含有CO2的微需氧环境中生长，生长温度范围-1.5℃-45℃，最适温度为30℃-37℃，能在普通冰箱冷藏室生长，是一种典型的耐冷性细菌，同时还具有耐盐性。LM在普通琼脂平板上呈细小直径约0.2-0.4μm、半透明露水样菌落。在血琼脂平板上有β溶血环。在显色培养基上呈蓝绿色。 生化鉴定法 该菌主要生化特性如下： 触酶阳性； 氧化酶阴性； 发酵多种糖类； 产酸不产气； 不发酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二塘； 不利用枸橼酸盐，40%胆汁不溶解； 吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性； VP、甲基红试验和精氨酸水解试验阳性； 对碱和盐抵抗力强，60-70℃经5-20分钟可杀死，70%酒精5min、2.5%石碳酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min可杀死此菌。 该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺均敏感。 血清凝集法 根据菌体抗原和鞭毛抗原，LM分为16个血清型：1／2a、1／2b、1／2c、3a、3b、3c、4a、4ab、4b、4c、4d、4e、5、6a、6b、7。抗原结构与毒力无关，对人致病的主要为血清型1／2a、1／2b、4b，占全球本病病例约90％。 关于血清凝集法用的诊断血清方面，推荐天津生物芯片公司生产的单增李斯特氏菌全套诊断血清产品，该菌最常见的O：3，O：5，O：8和O：9型的诊断血清 被纳入这套产品，详情如下： 二十三、单增李斯特菌诊断血清 规格：1ml*12瓶 数量 货号 血清品种 规格 全套 IM-LM012 单增李斯特菌诊断血清（成套总计） 1ml*12瓶/套 1 IM-LM012-1 单增李斯特菌诊断血清OⅠ/Ⅱ 1ml/瓶 2 IM-LM012-2 单增李斯特菌诊断血清OⅠ 1ml/瓶 3 IM-LM012-3 单增李斯特菌诊断血清OⅣ 1ml/瓶 4 IM-LM012-4 单增李斯特菌诊断血清OⅤ/Ⅵ 1ml/瓶 5 IM-LM012-5 单增李斯特菌诊断血清OⅥ 1ml/瓶 6 IM-LM012-6 单增李斯特菌诊断血清OⅦ 1ml/瓶 7 IM-LM012-7 单增李斯特菌诊断血清OⅧ 1ml/瓶 8 IM-LM012-8 单增李斯特菌诊断血清OⅨ 1ml/瓶 9 IM-LM012-9 单增李斯特菌诊断血清H-A 1ml/瓶 10 IM-LM012-10 单增李斯特菌诊断血清H-AB 1ml/瓶 11 IM-LM012-11 单增李斯特菌诊断血清H-C 1ml/瓶 12 IM-LM012-12 单增李斯特菌诊断血清H-D 1ml/瓶 核酸扩增法 核酸扩增技术，即聚合酶链式反应（polymerase chainreaction，PCR），其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸，作为引物，对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端，然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增，使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。 单增李斯特氏菌的检测，其特异性引物的设计，一种是依据它的基因组序列中的特异序列（16S或 16S/23S 间区的保守区域），一种是依据它的毒力基因序列（常用hlyA，iap等）。 【相关试剂推荐】 生产商 贷号 产品名称 包装规格（次/盒） 天津生物芯片公司 Cat.No.FP014 单核李斯特菌核酸扩增（PCR-荧光探针法）检测试剂盒 20 Cat.No.CP012 单核李斯特菌核酸扩增（PCR）检测试剂盒 20 Cat.No.FP021 单增李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌核酸扩增检测试剂盒（双色实时荧光PCR法） 20 Cat.No.FP02