贝类中神经性贝类毒素检验方法—小鼠生物法 征求意见稿.doc

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SN/T ××××—×××× SN/T ××××—×××× PAGE PAGE 1 代替SN 1573-2005中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布××××-××-××实施 代替SN 1573-2005 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发布 ××××-××-××实施 ××××-××-××发布 贝类中神经性贝类毒素检验方法 ——小鼠生物法 Determination of neurotoxic Shellfish Poisons in Shellfish ——Mouse biology method (征求意见稿) SN/T ××××—×××× SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ICS PAGE 4 PAGE 1 前 言 本标准代替SN 1573-2005 《贝类中神经性贝类毒素检验方法 小鼠生物法》。 本标准与SN 1573-2005相比主要修改如下: ——修改了原标准英文名称; ——增加规范性引用文件; ——修改了术语和定义中关于鼠单位的定义部分内容; ——修改了样品保存和制备的部分内容; ——修改了测定方法的部分内容; ——修改了结果表述的部分内容; ——增加了健康和安全内容。 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国质量监督检验检疫总局批准发布。 本标准主要起草单位:中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局 本标准主要起草人:赵昕、王秋艳、田苗、徐静、郑秋月、曹际娟、徐杨 本标准所代替标准历次版本发布情况为: ——SN 1573-2005。 贝类中神经性贝类毒素检验方法-小鼠生物法 范围 本标准规定了贝类及其制品中神经性贝类毒素的小鼠生物测定方法。 本标准适用于贝类及制品中神经性贝类毒素的检测。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 14925 实验动物 环境及设施 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 神经性贝类毒素 neurotoxic shellfish poisons,NSP 化学结构以短裸甲藻毒素(brevetoxin)为代表,摄食后可产生神经性和消化道症状的存在贝肉内的海洋生物毒素物质的总称。 3.2 鼠单位 mouse unit,MU 对体重为20 g的小白鼠腹腔注射1 mL贝类提取液后,在930 min时死亡所需的最小毒素量为1个鼠单位。 3.3 中位数 median data 把变量值按大小次序排列,居于中间位置的那个数值就是中位数。 样品保存和制备 4.1 样品的保存 4.1.1 分析样品要有充分的代表性,样品至少要10个以上,尽可能没有个体差异。去壳、带壳或罐装的贝肉,均应采取足够的个数并使贝肉达200 g以上。 4.1.2 远离实验室不能及时送检的样品,除了在常温下品质不会发生变化的,应将样品置于保温盒中冷冻送检。如为带壳样品,应按4.2的方法开壳,去除水分后冷冻送检。 4.2 样品的制备 4.2.1 生鲜带壳样品的前处理 用清水将贝壳外表彻底洗净,切断闭壳肌,开壳,用重蒸馏水淋洗内部去除泥沙及其他外来物。将闭壳肌和连接在胶合部的组织分开,仔细取出贝肉,切勿割破肉体。开壳前不要加热或用麻醉剂。收集200 g贝肉置于筛子中沥水5 4.2.2 冷冻样品的前处理 在室温下,使冷冻样品呈半冷冻状态。带壳冷冻样品,按4.2.1方法清洗、开壳、淋洗取肉,此时的贝肉仍呈冷冻状态,除去贝肉外部附着的冰片,轻轻抹去水分后;事先已去除水分的冷冻去壳样品,室温缓化。将200 g上述贝肉均质,备用 4.2. 将罐头内容物沥干水分,倒入均质器充分均质,备用 。 4.2 称取100 g干制品放入足量清水中浸泡24 h~48 h(4℃冷藏),沥干、均质、 4.2 用清水洗涤,流水脱盐, 沥干,均质、备用。 测定方法 5.1 方法提要 用乙醚提取贝类中NSP毒素,经减压蒸干后,再以1%吐温-60生理盐水为分散介质,制备NSP-1%-60生理盐水混悬液,将该混悬液注射入腹腔,观察小鼠存活情况,计算其毒力。 试剂和材料 除另有规定外,所有化学试剂均为分析纯或生化试剂,水为符合GB/T 6682规定的一级水。 5.2.1 浓盐酸 5.2.2 无水乙醚 5.2.3 1%吐温-60生理盐水:称取1.0g吐温-60,溶于生理盐水(0.85%氯化钠)中,并定容至100.0 mL 5.2.4 小白鼠

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