遗传学实验教程_百替生物.pdf

遗传学实验教程 主 编 徐振平 副主编 范雪辉 陈伟 王树芳 杨述芳 新乡医学院生命科学技术系 service@100 目 录 实 验 一 人 类 染 色 体 标 本 制 备 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 1 实验二 人类某些遗传性状（疾病）的调查分析………………………………………………………5 实 验 三 人 类 性 染 色 质 标 本 制 备 技 术 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 9 实验四 染色体显带与染色体高分辨显带技术……………………………………………………12 实验五 核型分析与人类异常核型观察分析……………………………………………………22 实验六 蚕豆根尖孚尔根（ F e u l g e n ）染色法）………………………………………31 实验七 诱变物质的微核检测技术--蚕豆根尖微核检测…………………………………………33 实 验 八 果 蝇 的 形 态 、 生 活 周 期 及 其 饲 养 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 3 5 实验九 果蝇唾腺染色体制片与观察……………………………………………………38 实验十 花粉活力的 碘-碘化钾染色测定…………………………………………………40 实验十一 大蒜根尖细胞多倍体的诱导和观察…………………………………………………41 实验十二 荧光原位杂交技术………………………………………………………………………43 service@100 实验一 人类染色体标本制备 人体内任何旺盛有丝分裂的细胞或者在体外适当培养下能旺盛分裂的组织细胞群，均可作为细胞 遗传学研究的材料，用于制备染色体标本。常用的材料有外周血淋巴细胞、骨髓细胞、羊水细胞、绒 毛细胞、胸腹水细胞、性腺活检组织、精子、实体瘤组织，以及皮肤、肝和肾等组织。这些材料按下 述方法进行处理后，都可作为研究人类染色体的材料，用于染色体病的诊断和产前诊断等。 【实验目的】 了解和掌握外周血细胞培养试剂的配制和消毒方法；学习、掌握培养细胞的染色体制备的一 般方法，掌握人类染色体的一般形态结构。 【实验器材和试剂】 1．仪器设备 超净工作台、带有照相装置的光学显微镜、隔水式恒温培养箱或CO 培养箱、恒温 2 水浴箱、电热干燥箱、离心机、冰箱、分析天平 （1/10 000）或电子天平、普通天平、高压蒸气灭菌 锅、小型真空泵、电吹风、pH 计、定时钟、秒表。 2．器材 G 型玻璃漏斗（细菌滤器）、蒸馏水瓶、蒸馏水器、10ml 刻度离心管、10ml 培养瓶（或 6 青霉素小瓶、带瓶塞）、2ml 注射器、吸管、滴管、烧杯、量筒、锥形瓶、试管架、三角烧瓶、染色缸、 酒精灯、各种试剂瓶、载玻片、镊子、吸水纸、洗耳球、搪瓷盘、铝制饭盒、酒精棉球、碘酒棉球以 及包布等。 3．试剂 RPMI-1640 培养液（含10％～20％小牛血清）、NaHCO 、PHA、青霉素、链霉素、肝素溶 3 液、秋水仙素或秋水仙胺、1mol/L HCl、双蒸水（ddH2O）、0.075mol/L KCl、甲醇、冰醋酸、Giemsa 染液液、pH6.8 的PBS。 【实验内容与方法】