艾滋病梅毒丙肝检测及结果意义.ppt

艾滋病梅毒丙肝实验室检测及影响结果因素分析 内容提要： 1.艾滋病检测程序、方法应用和注意事项。 2.梅毒检测程序、方法应用和注意事项。 3.丙肝检测程序、方法应用和注意事项。 4.影响实验室检测结果的因素分析 艾滋病检测方法 常用HIV病原学检测方法: 1. 核酸检测（ PCR、病毒载量） 2. 病毒培养分离 3. P24抗原检测 常用HIV抗体检测方法: 初筛：1.酶联免疫吸附法 ELISA：第三代、第四代 2.快速检测 RT：金标、硒标 3.简单法 PA: 明胶颗粒凝集 确证：免疫印迹法 WB:（Western Blot）、RIBA 其他相关检测方法: 免疫功能测定：CD4/CD8检测 HIV抗体检测目的 1 HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。 2 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要进行的体检等。 3 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV，包括献血员筛查和原料血浆筛查。 4 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。 HIV抗体检测的要点 1 根据目的选择检测方法及检测策略。 2 严格遵守实验室SOP。 3 筛查试验阳性，须作确证试验。 4 筛查试验阴性， 不应做确证试验。 5 筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。 HIV抗体筛查检测流程 初筛试验 1、HIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复检）和确证试验。 2、根据检测目的选用符合要求的筛查试剂对样品进行初筛检测，对呈阴性反应的样品，可出具HIV抗体阴性（-）报告；对呈阳性反应的样品，需要进一步做复检试验和确证试验。 复检试验 对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验。 如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包括一种抗原抗体联合试剂。 如两种试剂复检均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性（-）；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确证实验室进行确证试验。 如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进行HIV-1 p24抗原或核酸检测，必要时进行随访。 确证试验 1 确证试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂。 2 确证样品可采用血清、血浆、滤纸干血斑样品。 3 确证方法包括免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）等。 HIV抗体不确定（±） 结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进展，但不满足阳性标准，应继续随访到8周。如带型没有进展或呈阴性反应则报告阴性；满足HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准可视情况决定是否继续随访。 随访期间可根据需要，检测病毒核酸或P24抗原作为辅助诊断。如果出现HIV-2型的特异性指示条带，根据实际情况需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确证试验或HIV-2核酸检测，以进一步明确HIV-2感染状态，疑难样品送国家艾滋病参比实验室进一步分析。 HIV-2抗体阳性 出现HIV-2型特异性指示带的样品：如果同时呈HIV-1抗体阳性反应，报告HIV-1抗体阳性，不推荐进一步做HIV-2抗体确证试验；如果同时呈HIV-1抗体不确定或阴性反应，需用HIV-2型确证试剂再做HIV-2的抗体确证试验。 同时符合以下二条标准，即出现至少2条env带（gp36和gp140/ gp105），和试剂盒提供的阳性判定标准，可判为HIV-2抗体阳性。 艾滋病快速检测试验（RT） 是在ELISA基础上发展起来的一种检测技术，它用胶体金或硒标记抗原、抗体后以层析方法进行检测。 突出优点为快速、试剂便于保存、检测不需要特殊设备并可以单份检测 ，比较适用于基层医疗单位和标本初筛。 挑战：进一步提高检测灵敏度和特异性，实现检测多元化，进行定量和半定量检测胶体金纸条将会更加广泛地应用于各个领域。 快速试剂使用中存在的问题 快速检测只是初筛检测，存在较高的假阳性率和假阴性率； 技术上属于主观判读，不具备标准化条件； 快速检测的质量控制问题目前没有有效方法； 价格是常规技术的5倍。行政经费政策不支持，个人支付价位高； 存在较大的批间误差，加上不属于政策规定项目