变应性鼻炎患者鼻黏膜淋巴细胞亚群分型及表达谱的研究-耳鼻咽喉科学专业论文.docx

安徽医 安徽医科大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 材料与方法………………………………………………………………7 结 果…………………………………………………………………11 讨 论…………………………………………………………………21 结 论…………………………………………………………………27 参考文献…………………………………………………………………27 附 录…………………………………………………………………32 本人简历…………………………………………………………………32 科研成果目录……………………………………………………………32 致 谢…………………………………………………………………33 综述及参考文献 综 述…………………………………………………………………34 参考文献…………………………………………………………………40 英文缩略词 英文缩略词 英文全称 中文全称 AR Allergic rhinitis 变应性鼻炎 Th1 Type 1 helper T cells 1 型辅助性 T 细胞 Th2 Type 2 helper T cells 2 型辅助性 T 细胞 2 NK Natural killer cells 自然杀伤细胞 FITC Fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 APC Allophycocyanin ceruloplasmin 别藻兰蛋白 PerCP Peridinin chlorophyll protein 多甲藻叶绿素蛋白 3 万方数据 万方数据 变应性鼻炎患者鼻黏膜淋巴细胞亚群分型及 表达谱的研究 摘要 目的 采用流式细胞术检测变应性鼻炎(allergic rhinitis，AR)患者和正常人的 鼻黏膜组织以及外周血中的淋巴细胞亚群(CD3+T、CD4+T、CD8+T、NK、CD19+B) 的比例，并且应用基因芯片的技术研究同一个人的鼻黏膜局部 CD8+T 淋巴细胞的表 达谱与外周血中的 CD8+T 淋巴细胞的表达谱的差别，研究鼻黏膜和外周血淋巴细胞 的功能的差异。初步探讨 AR 患者鼻黏膜局部免疫功能的改变，为探讨 AR 的发病 机制提供理论依据，为鼻局部黏膜免疫性疾病的研究提供更多的参考。 方法 用鼻黏膜刮匙获取 38 例 AR 患者和 23 例正常人的鼻黏膜组织，并抽取其外 周血 2ml。采用流式细胞术分别检测其鼻黏膜和外周血中的淋巴细胞亚群(包括 CD3+T、CD4+T、CD8+T、NK、CD19+B)分别所占的比例。应用流式细胞分选技术 和基因芯片技术检测鼻黏膜和外周血 CD8+T 细胞的表达谱。 结果 比较同一个研究对象的鼻黏膜和外周血的研究结果发现，鼻黏膜和外周血的 淋巴细胞亚群比例差异显著，鼻黏膜和外周血相比较，CD3+T 比例增加（t=15.34， p0.0001）、CD4+T 比例降低（t=5.952，p0.0001）、CD8+T 比例增加（t=12.44， p0.0001）、NK 比例降低（t=4.865，p0.0001）、CD19+B 比例降低（t=15.56， p0.0001），CD4+T / CD8+T 降低,差异具有统计学意义。可见鼻黏膜中 CD8+T 细胞 占的比例较高，而外周血中则是 CD4+T 细胞占的比例较高。 AR 患者和正常人鼻黏膜的淋巴细胞亚群比较，除 CD19+B 细胞比例增加外，其 它各项比例均无明显差异，AR 患者和正常人相比较，CD3+T 比例差异不显著 （t=1.180，p=0.2427）、CD4+T 比例差异不显著（t=0.7312，p=0.4675）、CD8+T 比 例增加（t=12.44，p=0.6933）、NK 比例差异不显著（t=0.3964，p=0.6933）、CD19+B 比例增加（t=4.363， p0.0001），差异具有统计学意义。 AR 患者和正常人外周血的淋巴细胞亚群比较， CD3+T 比例降低（t=2.117， p=0.0391）、CD4+T 降低（t=2.367，p=0.0218） ，差异具有统计学意义，CD8+T 比 例差异不显著（t=0.2320，p=0.8 175）、NK 比例差异不显著（t=1.464，p=0.1494）、 1 安徽 安徽医科大学硕士学位论文 CD19+B 比例差异不显著（t=0.4010， p=0.6902）。 基因芯片分析结果：鼻黏膜同外周血相比 CD8+T 细胞在基因水平以及外显子 水平差异数目：上调 14280，下调 8696。其功能主要与细胞增殖和凋亡等代谢途 径、信号转导、物质跨膜转运、RNA 运输、蛋白质合成、免疫功能、抗原加工和呈 递等有关。目前分析发现其功能差异涉及 JAK-STAT 通路等的改变。 结论 5.1 同一个研