代谢组学-样品-鹿明生物.PDF

代谢组学样品指南 - 鹿明生物 技术部 代谢组样品准备指南 样品类型 非靶向最低送样量 靶向最低送样量 样本收集参考步骤 1.如果组织上有血，先用用生理盐水漂洗掉； 2.根据具体实验设计取特定的部位，200mg/管装入标记好的离心管中； 3.迅速放入液氮中冷冻处理至少15min； 动物组织 200mg 200mg 4.-80℃冰箱冻存。足量干冰寄送。 注意：对于类似斑马鱼大脑组织、小鼠海马组织等单个实验动物组织重量远低于100mg的 情况，可混样。 1.收集到新鲜粪便或肠道内容物样本； 2.添加一滴 （约10uL）质量体积比为1/100 （w/v）的叠氮化钠，分装样本200mg/管； 3.迅速放入液氮中冷冻处理至少15min； 粪便或肠 200mg 200mg 4.-80℃冰箱冻存。足量干冰寄送。 道内容物 注意：1.叠氮化钠的作用是防腐杀菌，有毒，请万分小心； 2.由于粪便/肠道内容物中有非常多的微生物，微生物代谢速度非常快，所以反复冻 融会对代谢水平有非常大影响。强烈建议样本收集后，分装冻存。 1.晨起中段尿 （临床）或晨间1h尿 （动物）直接分装到离心管中，每管1mL； 2.添加质量体积为1/100 （w/v）的叠氮化钠， 尿液 1ml 1ml 3.-80℃冰箱冻存，足量干冰寄送。 注意：1.动物1h尿量不够，可分多次收集，如果需要收取24h尿液，请使用带有低温装置 的代谢笼收取，并添加叠氮化钠； 2.叠氮化钠的作用是防腐杀菌，有毒，请万分小心。 1.准备淬灭试剂：配制 60%甲醇水（v/v，需要 2mL/管，可根据样本数量来计算所需总量）， -40℃预冷备用 2.淬灭：取2mL预冷的甲醇水置于5mL离心管中 （建议干冰上操作），取出2mL菌液迅速 加入到淬灭试剂中，手摇动混匀5s （不要用涡旋）； 3.将淬灭好的菌液进行离心，3000rpm，10min，4℃； 微生物 10^8 10^8 4.去除上清； 5.足量干冰寄送 （如需长期保存请冻存到-80℃冰箱内）。 注意：1.微生物代谢速度非常快，所以所有的步骤需要尽快完成； 2.菌体数量不同样本间需要保持一致； 3.一般OD600≈0.6 时，细菌处于生长指数，其浓