条锈菌诱导下的小麦叶片总RNA提取方法的比较及LD2PCR.PDF

麦类作物学报 　2007 ,27 (3) :47 1 - 474 J ournal of Triticeae Crop s 条锈菌诱导下的小麦叶片总 RNA 提取 方法的比较及 LDPCR 扩增 余 　宇 ,王晓杰 ,韩青梅 ,康振生 ( 西北农林科技大学植物保护学院 ,陕西省农业分子生物学重点实验室 , 陕西杨凌 7 12 100) 　　摘 　要 : 为寻找一种既能提取到高质量高产量小麦 RN A 、又能提取到高质量条锈菌 RN A 的方法 ,利用 Trizol 法 、Licl 法 、SD S 法和 Bizol 法分别从条锈菌诱导的小麦叶片中提取了总 RN A ,并对 Trizol 法和Bizol 法 ( ) 提取的 RNA 进行了长距离 PCR LDPCR 扩增 。结果表明 , Trizol 法 、L icl 法 、SD S 法和 Bizol 法提取的 RN A (μ ) μ 产量 g/ 100 mg 鲜重叶片 分别为 4 . 72 、1. 15 、1. 56 、10 . 43 g/ 100 mg , Trizol 法和 Bizol 法提取的 RN A 产量 明显高于Licl 法和 SD S 法 。Trizol 法提取的 RNA 合成的cDN A 片段大小主要集中在 0 . 25～2 . 0 kb 范围内, 而 Bizol 法提取的 RN A 合成的cDN A 片段大小主要集中在 0 . 5～5 . 0 kb 范围内,Bizol 法提取的 RN A 反转录 合成的 cDN A 质量好于 Trizol 法 。Bizol 法同样能提取到高质量的条锈菌 RN A ,而且提取 RN A 的成本较低 。 综合各种因素 ,Bizol 法是条锈菌诱导下的小麦叶片总 RN A 提取的较理想方法 。 　　关键词 : 小麦 ; 条锈菌 ; RN A ; LDPCR ( ) 　　中图分类号 :S5 12 . 1 ; S332 . 2 　　　　文献标识码 : A 　　　　文章编号 :1009104 1 2007 03047 104 Comparison of Diff erent Protocol s of Extracting Total RNA f rom Rust Induced Wheat Leaves and LDPCR Ampl if ication Y U Yu , WANG Xiaoj ie , HAN Qingmei , KANG Zhensheng ( Plant Prot ection College and Shaanxi Key L aboratory of Molecular Biology for Agricult ure , Nort hwest A F U niver sit y , Yangling , Shaanxi 7 12 100 , China) Abstract : To find a p rotocol of ext racting RN A t hat ha s high p ro duction and goo d quantit y f ro